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目的： 本研究主要是明确高分压氧(HyperbaricOxygenation，HBO)诱导的氧化应激对线粒体膜损伤的表现及氢气的抗氧毒性作用;探讨分子氢保护线粒体膜免受氧化损伤的可能机制，为医疗安全用氧提供重要的理论依据。 材料与方法： (1)分组:未分化型大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤(PC12)细胞长满培养瓶底70％-80％时随机分组。分别给予5个绝对大气压(AtmosphereAbsolute，ATA)空气、5ATA空氢混合气（氢气和空气的混合气，两者的体积比为2％∶98％）、5ATA氮氧混合气（氮气和氧气的混合气，两者的体积比为2％∶98％）、5ATA氢氧混合气（氢气和氧气的混合气，两者的体积比为2％∶98％）处理2小时。升压30min，稳压2h，减压30min。 (2)指标的测定:①细胞三磷酸腺苷(AdenosineTriphosphate，ATP)水平的测定:用ATP检测试剂盒通过生物发光法测定细胞ATP水平;②细胞线粒体膜电位(MitochondrialMembranePotential，MMP)的测定:用TMRM荧光探针标记线粒体膜电位，激光扫描共聚焦显微镜(LaserScanningConfocalMicroscope，LSCM)照相，ImageJ软件测定细胞荧光强度;③4-羟基壬烯酸(4-HydroxyNonanoicAcid，4-HNE)的测定:用酶联免疫分析(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay，ELISA)试剂盒测定细胞上清中4-HNE含量;④透射电镜下线粒体超微结构的变化;⑤细胞中羟基(Hydroxyl，·OH)的测定:用HPF荧光探针标记·OH，LSCM照相，ImageJ软件测定细胞荧光强度;⑥细胞中过氧化氢(HydrogenPeroxide，H2O2)的测定:用DCFH-DA荧光探针标记H2O2，LSCM照相，ImageJ软件测定细胞荧光强度;⑦细胞中一氧化氮(NitricOxide，NO)的测定:用DAF-FMDA荧光探针标记NO，LSCM照相，ImageJ软件测定细胞荧光强度。 结果： (1)5ATA氮氧混合气组、氢氧混合气组的细胞ATP水平均低于5ATA空气组，差异具有统计学意义(P＜0.05);5ATA氢氧混合气组的细胞ATP水平高于5ATA氮氧混合气组，差异具有统计学意义(P＜0.05);5ATA空氢混合气组的细胞ATP水平略低于5ATA空气组，但差异尚无统计学意义(P＞0.05)。 (2)5ATA氮氧混合气组、氢氧混合气组的MMP水平均低于空气组，差异具有统计学意义(P＜0.0125);5ATA氢氧混合气组的MMP水平高于5ATA氮氧混合气组，差异具有统计学意义(P＜0.0125);空氢混合气组的MMP水平和空气组间的差异尚无统计学意义(P＞0.0125) (3)5ATA氮氧混合气组、氢氧混合气组的4-HNE水平高于空气组，差异具有统计学意义(P＜0.05);5ATA氢氧混合气组的4-HNE水平低于5ATA氮氧混合气组，差异具有统计学意义(P＜0.05);空氢混合气组的4-HNE水平略高于空气组，但差异尚无统计学意义(P＞0.05)。 (4)空气组与空氢混合气组的细胞内线粒体的双层外膜完整，嵴连续，基质未见水肿或稍有水肿;5ATA氢氧混合气组的细胞内线粒体稍肿大，双层外膜欠完整，嵴的连续性偶有中断;5ATA氮氧混合气组的细胞内线粒体水肿明显，甚至被涨破，双层外膜及嵴的连续性均消失，甚至丧失线粒体原有形态。 (5)5ATA氮氧混合气组、氢氧混合气组的·OH水平均高于空气组，差异有统计学意义(P＜0.0125);5ATA氢氧混合气组的·OH水平低于5ATA氮氧混合气组，差异具有统计学意义(P＜0.0125);空氢混合气组的·OH水平和空气组间的差异尚无统计学意义(P＞0.0125)。 (6)5ATA氮氧混合气组、氢氧混合气组的H2O2水平均高于空气组，差异有统计学意义(P＜0.0125);5ATA氢氧混合气组的H2O2水平低于5ATA氮氧混合气组，但差异无统计学意义(P＞0.0125);空氢混合气组的H2O2水平和空气组间的差异尚无统计学意义(P＞0.0125)。 (7)5ATA氮氧混合气组、氢氧混合气组的NO水平均高于空气组，差异有统计学意义(P＜0.0125);5ATA氢氧混合气组的NO水平低于5ATA氮氧混合气组，但差异无统计学意义(P＞0.0125);空氢混合气组的NO水平和空气组间的差异尚无统计学意义(P＞0.0125)。 结论： 1.高分压氧诱导的氧化应激对线粒体膜有损伤作用，其中·OH发挥主要作用。 2.2％的氢气是通过有效拮抗·OH来发挥抗氧化损伤作用的。