Kiss-1对裸鼠鼻咽癌移植瘤转移的抑制作用

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目的:(1)探讨 Kiss-1基因在鼻咽癌转移中的抑制作用(2)评价通过转染技术把Kiss-1基因转入体内在鼻咽癌的防治中的应用价值。  方法:(1)构建了含Kiss-1重组慢病毒质粒并转染该基因低表达的鼻咽癌细胞株(SUNE-1-5-8F),并将其经过嘌呤霉素的筛选,从而获得了Kiss-1基因高表达的稳转细胞,并对其进行培养、传代、冻存及复苏。(2)用Western blot来检测转染前后 Kiss-1蛋白的表达水平及荧光定量反转录-聚合酶链反应来检测转染前后Kiss-1mRNA的表达水平。(3)将转染 Kiss-1的鼻咽癌细胞(SUNE-1-5-8F)及未转染的鼻咽癌细胞(SUNE-1-5-8F)分别接种至40只裸鼠腋下,分为2组,每组20只,每周观察2-3次肿瘤生长的情况,裸鼠养至2个月左右时将其处死,解剖出肿瘤及肝、肺等脏器,并对裸鼠腋下移植瘤行免疫组化检查,在组织水平上验证Kiss-1是否转入鼻咽癌细胞(SUNE-1-5-8F)中,并对裸鼠肝肺行病理检查,比较两组裸鼠肺肝等转移瘤的多少,差别是否有意义。  结果:(1)我们将Kiss-1基因成功转入鼻咽癌细胞株(SUNE-1-5-8F),完成了转染后细胞的培养、传代、冻存、复苏等。(2)转基因组 Kiss-1蛋白及 mRNA的表达较空质粒转染组和对照组显著增加(P<0.05),另转染组与未转染组裸鼠腋下移植瘤行免疫组化检查,结果示转染组 Kiss-1基因的含量高,从而从基因、蛋白及组织水平上验证了Kiss-1成功转染到鼻咽癌细胞株(SUNE-1-5-8F)中。(3)将肝肺等组织行病理检查,结果示转染组裸鼠肺转移(1个)较未转染组裸鼠的转移(8个)数目少(P<0.05),2组裸鼠肝均未见转移,而2组裸鼠腋下移植瘤重量的大小无统计学意义。  结论:本实验中通过基因转染的方法能使 Kiss-1基因表达并有活性,利用鼻咽癌在裸鼠中肺等脏器中转移的动物模型,验证Kiss-1基因可以抑制鼻咽癌移植瘤的转移。
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