香港牡蛎（Crassostrea hongkongensis）是我国主要的海水养殖贝类,目前香港牡蛎在养殖、资源状况及育种方面都存在诸多问题,优化其精子超低温冷冻保存技术意义重大,本论文采用冷冻程序降温仪对香港牡蛎精子进行超低温冷冻保存研究,通过检测超低温冷冻保存前后精子活率、活力、酶活力、DNA损伤程度以及受精率来筛选最佳DMSO浓度、降温程序和复苏方法,优化香港牡蛎精子超低温冷冻保存方法,为香港牡蛎优良种质的长期保存和育种生产实践提供种质素材和技术支持,也为其他贝类精子冷冻共性技术的建立提供参考。实验结果如下:1.离体精子在4℃低温状态下最佳存放时间为8 h以内。2.香港牡蛎精子超低温保存以12%DMSO为抗冻剂,通过降温程序B:从4℃开始以5℃/min的速率降至﹣25℃,在﹣25℃平衡5 min后,再以10℃/min的速率降至﹣80℃,在﹣80℃平衡5 min,最后投入液氮罐（﹣196℃）保存。3.香港牡蛎精子超低温冷冻保存前后酶活力的变化:SDH、LDH、ATP、SOD、CAT五种酶冷冷保存后显著降低,而GR酶显著升高。4.单细胞凝胶电泳法检测超低温冷冻前后香港牡蛎精子DNA损伤可得冷冻损伤越大,彗星率和损伤系数就越大,SOD等五种酶活性就越小,GR活性则越高,当SOD酶活力低于96 U/m L、CAT酶活力低于92 U/m L、GR活力高于108 U/L时彗星率高于38%损伤系数超过27%,损伤程度显著增大。5.超低温冷冻保存前后牡蛎精子的受精率:程序B中当精卵比在40:1时的受精率可达到鲜精10:1的受精率。实验表明冻精的活率、活力、酶活力以及DNA损伤程度对其受精率影响显著,且影响程度与超低温冷冻后酶活性和DNA损伤程度同鲜精的差异大小有关,当ATP冻精﹤84%ATP鲜精、SDH冻精﹤91%SDH鲜精、LDH冻精﹤85%LDH鲜精、SOD冻精﹤71%SOD鲜精、CAT冻精﹤89%CAT鲜精、GR冻精﹥120%GR鲜精时DNA损伤严重（彗星率﹥50%,损伤系数﹥40%）,精子存活率低于70%,活力低于65%,在精卵比为40∶1时的受精率低于60%,与鲜精差异显著。本实验所得结果可为其他种类相关的研究提供参考。