鲫鱼喉粘孢子虫病是一种危害严重的鱼类寄生虫疾病,人们对粘孢子病害防治方面做了大量的工作,主要包括化学药物法、物理方法、生态防治法及管理控制法。近年来,国内在鱼类粘孢子虫免疫学方面开展了许多有益的探索,如用病鱼抗血清作为探针用于判断粘孢子虫的感染,证明了宿主血清中存在抗体;用提取的抗原进行了虫体的交叉反应实验,结果表明圆形碘泡虫生活史中存在共同抗原和属特异性抗原;用间接荧光抗体实验对圆形碘泡虫进行抗原定位,为特定抗原单抗的制备打下了坚实的基础。本研究通过对鲫鱼粘孢子虫病原的分离、鉴定,建立一种病原灵敏检测方法,并尝试用核辐射致弱鲫鱼喉粘孢子虫来研究鲫鱼的免疫活性。本文对江苏省溧阳市2013年8月4日采集到鲫鱼喉粘孢子虫:洪湖碘泡虫(M.honghuensis)进行相关研究:1、病原的分离、鉴定。采样病鱼体黑消瘦,口张开,口腔发红,喉上部肿胀(半边或全部)充血、发炎,严重时将咽腔堵住;喉部上皮组织包裹着巨大的白色孢囊。解剖显微检测发现视野下布满大量微小孢子,孢子壳面观呈卵形,前端稍尖,壳面光滑,囊间突起不明显,缝面观呈长椭圆形两端稍尖,缝脊粗而直,两个棒状的极囊大小相等,呈“八”字型排列在孢子的前端,极丝盘绕6～7圈。18S rDNA序列比较分析与文献中报道的洪湖碘泡虫序列一致。根据形态和分子序列确认病原为洪湖碘泡虫。2、建立了洪湖碘泡虫巢式PCR检测技术,Nest-F&R作为喉孢子虫病PCR诊断引物有很好的特异性,并确定巢氏PCR的检测灵敏度比单轮PCR反应灵敏度高出2-3个数量级。3、通过钴-60辐射源对喉粘孢子虫进行辐照致弱。辐射吸收剂量:100Gy(10krad),150Gy(15krad),200Gy(20krad),辐照后体腔免疫注射入鲫体内。设立1个组对照,3个实验组,每组20尾,共计80尾。养殖48天后,抽取血清离心分离做直接血凝试管凝集试验,辐射吸收剂量100Gy(10krad)的效价为1:640,辐射吸收剂量150Gy(15krad)时效价为1:1280,辐射吸收剂量200Gy(20krad)时效价为1:320。对照组效价为零。辐射吸收剂量150Gy(15krad)时对鲫鱼喉粘孢子虫产生了最大的抑制和破坏作用,该剂量致弱的鲫鱼喉粘孢子虫免疫的鲫鱼获得了最大的保护力。本试验为应用核辐射生产鲫鱼喉孢子虫病疫苗作出了初步的探索。探索开发有效的鲫鱼喉孢子虫病疫苗不仅可以保护鱼类的健康,提高对疾病的抵抗力,还可以避免因使用药物带来的药物残留和病原菌耐药性问题,对保障我国水产养殖业健康可持续发展,提高我国食品安全水平具有重要的经济、社会和生态意义。