明目“五子”对视网膜光化学损伤的防治作用及其机理的实验研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:jim2y
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目的:观察光照后大鼠视网膜的病理形态、生化及电生理方面的改变;探讨中药明目“五子”对大鼠视网膜光损伤的保护作用及其机理。 方法:采用绿色荧光灯持续照射24小时造成大鼠视网膜光损伤。分别于光照前、光照后即刻、光照后14天,进行视网膜光镜、电镜形态学观察和外核层厚度测量,同时用TUNEL法标记细胞凋亡;使用高效液相色谱仪测定视网膜游离氨基酸的变化;并于光照前、光照后即刻、光照后3、7、14天行多焦视网膜电图(mfERG)的检测。用同样的方法造模,同时给予明目“五子”高、低剂量灌胃,连续给药14天后,作mfERG检查,进行视网膜光镜形态学观察、外核层厚度测量,并用TUNEL法标记细胞凋亡;免疫组织化学法观察视网膜碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;采用硝酸还原酶法测定视网膜NO的含量;进行氨基酸的检测。 结果:(1)光照前视网膜形态正常。光照后视网膜出现大量细胞凋亡,外核层变薄,与光照前比较有显著性差异(P<0.01),内外节排列紊乱,分界不清,细胞核肿胀,内节线粒体肿胀,外节盘膜水肿、断裂、空泡变,RPE细胞微绒毛几乎消失,溶酶体增多。14天后各种损伤均有所减轻,但外核层继续变薄;明目“五子”高剂量组视网膜外核层厚度显著高于模型对照组,细胞凋亡率显著低于模型对照组,二者在统计学上均有显著性差异(P<0.01)。(2)“五子”高剂量组能显著减低视网膜GFAP的表达,增强bFGF的表达,与模型对照组比较统计学上有显著性差异(P<0.01);且二者的负相关关系具有显著性意义(P<0.01)。(3)光照后视网膜天门冬氨酸(ASP)、谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)含量升高,与正常对照组比较有显著性统计学上有显著性差异(P<0.01);14天后有所降低,但与正常对照组比较,仍有显著性意义(P<0.01);高剂量组视网膜氨基酸含量与模型对照组比较明显降低,统计学上有显著性意义(P<0.05)。(4)光照后,大鼠视网膜NO含量升高,与正常对照组比较,统计学上有显著性差异(P<0.01);“五子”高、低剂量组能减低视网膜NO的含量,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05~0.01)。(5)光照后视网膜m犯RG显示,大鼠视网膜Nl、Pl波各环反应密度明显降低,与光照前比较统计学上有显著性差异(P<0.01),14天后仍未恢复,与模型对照组比较,“五子妙高剂量组Nl、Pl波反应密度明显升高,具有显著性差异(P<0 .05一0.01)。 结论:明目“五子”具有减轻视网膜光损伤,以及促进光损伤后视网膜的修复和视功能的恢复的作用。其作用机理与减轻NO对视网膜的毒性、调控视网膜神经递质的异常,增强视网膜神bFGF表达、抑制神经胶质细胞增生,从而抑制视网膜细胞凋亡有关。
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