研究将乙二醇二缩水甘油醚（EGDE）作为蛋白质交联剂, 用来交联血红蛋 白(Hb), 制备红细胞代用品。 探索了这一交联反应的可行性，优化了交联条件。本文还发展了一种活性基 团干扰法，间接测定出EGDE在pH7.5下，主要作用基团为血红蛋白的巯基, 在 pH8.7 和 9.5 的条件下，主要作用基团为血红蛋白的氨基。 采用 SDS-PAGE 电泳、高效液相色谱和多角度激光散射联用法检测交联反 应结果。实验表明，不同的反应条件下可得到不同的反应产物，在35℃、pH8.7、 较低的血红蛋白浓度（20mg/ml）和相对较高的修饰剂比例（摩尔比 EGDE:Hb=100:1）下反应 4 小时，主要产物为分子内部亚基之间交联的血红蛋白， 且分子内交联血红蛋白相对总蛋白含量90%以上；在pH7.5、较高的血红蛋白浓 度（200mg/ml）和相对较低的修饰剂比例（摩尔比 EGDE:Hb=25:1）下反应 12 小时，主要产物为分子间交联寡聚血红蛋白，分子量范围在140－380KD之间， 其中二聚体血红蛋白占总蛋白量的74.7%，三聚体血红蛋白18.9％，四到六聚血 红蛋白6.4％，几乎无高聚物生成，是红细胞代用品的最佳分子量。 小鼠的安全性实验表明产品无毒性，论证了其作为红细胞代用品的生物安全 性。进一步研究了 EGDE 分子内交联血红蛋白和分子间交联寡聚血红蛋白各种 性质，包括携氧特性、等电点、交联特性、全波长扫描分析、蛋白质二级结构分 析等，探讨了其作为红细胞代用品的可行性。