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本文以野生大弹涂鱼为研究对象,运用多种组织学染色方法、免疫细胞化学方法和酶联免疫分析技术,对大弹涂鱼脑垂体组织结构、脑垂体促性腺激素水平的季节变化以及生殖季节潮汐对大弹涂鱼产卵行为和血浆性类固醇激素含量的影响进行深入研究和分析,所得结果与结论如下:
1.大弹涂鱼脑垂体的组织学和免疫细胞化学研究大弹涂鱼脑垂体为扁平型,由神经垂体和腺垂体组成。腺垂体又分为RPD、PPD和PI三个部分。实验采用AF、HA、HE和Mallory染色法,结合免疫组织化学方法,对大弹涂鱼脑垂体的7种内分泌细胞进行鉴定和定位。RPD主要为PRL、LH和ACTH细胞;PPD主要有GH、FSH和TSH细胞;PI主要有MSH细胞和ACTH细胞。
2.脑垂体FSH和LH水平的季节变化年生殖周期中,大弹涂鱼雌鱼脑垂体FSH和LH细胞季节变化如下:成熟产卵期间,FSH和LH免疫阳性反应均很强,FSH细胞和LH细胞数量都增多。产后退化期,FSH细胞数量显著减少,仅在PPD腹缘检测到个别FSH细胞,且呈弱免疫阳性反应:LH细胞数量也有所减少,但仍检测到较多的LH细胞,且呈较强的免疫阳性反应。卵巢发育早期(即卵母细胞小生长发育期),FSH细胞数量及阳性反应强度较退化期均有明显增加;而LH细胞数量则继续减少,阳性反应强度也进一步降低。卵巢发育后期(即卵母细胞大生长期,卵黄积累阶段),FSH细胞数量进一步增加,阳性反应强烈;相反,LH细胞则未被检测到。
3.生殖季节潮汐对大弹涂鱼GSI和血浆性类固醇激素含量的潮汐变化生殖季节,大弹涂鱼GSI与Ripe%变化表现出明显的半月周期性。雌鱼血清E2、17α-OHP和T水平以及雄鱼血清T和11-KT水平的变化也表现出明显的半月周期性。在2个半月周期内(2006年5月31日至6月30日),雌鱼血清E2、17α-OHP和T水平的二个峰值分别出现在上弦月过后3天(即第一个小潮后3天和下弦月(即第二个小潮后)。雄鱼血清11-KT和T水平的二个峰值出现的时间与雌鱼相同。我们的研究发现,当雌、雄鱼性腺处于相同的发育期,且雌鱼GSI之间差异不显著(GSI为5.97-6.86%),雄鱼GSI之间差异也不显著(GSI为0.255-0.288%)时,雌、雄鱼血清性类固醇水平仍表现出明显的半月周期性。这表明,大弹涂鱼血清性类固醇激素水平的变化主要受外界环境因子,特别是潮汐变化的影响。