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目的:本课题旨在提高X染色体的鉴别能力,为法医X染色体分型提供新的遗传标记。依托毛细管电泳激光荧光检测平台,运用荧光标记复合扩增技术,对3个X-STR基因座进行片段分析,建立一套新GATA165812、DXS6800、GATA31E08三个X-STR的基因座复合扩增体系,为等位基因的命名奠定基础,为法医学应用提供概率计算依据。
方法:PCR扩增154名无关河南汉族女性个体和65名无关河南汉族男性个体血样DNA样本,PCR产物先使用聚丙稀酰胺凝胶电泳分离,EB染色紫外显像,后用自行设计的荧光标记引物复合扩增,毛细管电泳荧光自动检测系统对复合扩增产物进行检测和分型,用实际案例进行验证。
结果:154名河南汉族女性无关个体和65名河南汉族男性无关个体在GATA165812、DXS6800、GATA31E08三个X-STR的基因座分别检出4、7、12个等位基因,杂合度观察值分别为0.617、0.266和0.766。154名河南汉族女性无关个体DP值分别为0.806、0.46和0.906,PIC值分别为0.57、0.28和0.72,PE值分别为0.312、0.051和0.538,三个基因座累计个人识别能力为0.99015,三个基因座累计非父排除概率为0.6984;经卡方检验,三个STR位点的Hardy-weinberg平衡概率均大于0.05。65名河南汉族男性无关个体中检测28种单倍型,其单倍型GD为0.9529。
结论:对三个X-STR基因座的种属特异性、组织特异性、灵敏度及实际案件中的应用等问题进行研究,结果表明三个X-STR基因座具有较好的种属特异性、组织特异性、灵敏度高,应用荧光标记X-STR复合扩增检验技术在实际检案中具有良好效果。