POI患者血浆中circRNA表达谱及不同阶段中医体质研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ghchao0605
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目的:1.辨识早发性卵巢功不全(POI)的中医体质,以期发现POI的易感体质,早期干预易感人群,延缓甚至逆转疾病;探讨POI不同阶段是否存在体质偏颇,为疾病进展的病机变化及为不同阶段中医治疗提供依据。2.调查早发性卵巢功不全(POI)的发病相关因素,对高危人群早期防治。3.通过环状RNA芯片技术筛选POI患者血浆中差异表达的circRNA,并应用qRT-PCR技术对部分差异表达的circRNA进行验证,以期发现POI的潜在标志物,为进一步探索POI发病机制及治疗靶点提供新方向。方法:1.选取2017年06月至2018年12月就诊于广州中医药大学第一附属医院妇科门诊,符合POI、亚临床POI诊断标准的患者发放《发病相关因素调查表》及《中医体质调查量表》,月经周期规律且未发现其他任何疾病的自愿参加研究者发放《中医体质调查量表》进行问卷调查。进行数据统计,对比其发病相关因素及中医体质的分布情况。2.收集POI患者和健康对照者各5例,用circRNA芯片技术检测两组血浆中circRNA的表达情况,进行数据分析,筛选出差异表达的circRNA。应用实时荧光定量PCR,对部分上述差异表达的circRNA在10例POI患者和10例健康对照者血浆样本中进行验证,明确其表达情况。结果:1.94例POI组、86例亚临床POI组、92例正常组中医体质调查结果:POI组中医体质出现的频率从高到低依次为气虚质(61.8%)>阳虚质(60.67%)>气郁质(55.06%)>阴虚质(52.81%)>血瘀质(42.70%)>痰湿质(41.57%)>湿热质(29.21%)>特禀质(7.87%)>平和质(5.62%);86例亚临床POI组中医体质出现的频率从高到低依次为阳虚质(59.76%)>气虚质(47.56%)>气郁质(46.34%)>湿热质(36.59%)>痰湿质(34.15%)>血瘀质(29.27%)>阴虚质(28.05%)>特禀质(6.1%)>平和质(1.22%);92例正常组中医体质出现的频率从高到低依次为气郁质(45.3%)>阳虚质(41.86%)>湿热质(37.21%)>阴虚质(34.15%)>气虚质(33.72%)>痰湿质(32.56%)>血瘀质(20.93%)、平和质(15.2%)>特禀质(12.8%)。其中POI组与正常组在气虚质、阳虚质、阴虚质、血瘀质、平和质上的差异具有统计学意义;亚临床POI组与正常组在平和质、阳虚质上的差异具有统计学意义;POI组与亚临床POI组在阴虚质上的差异具有统计学意义。2.94例POI组和86例亚临床P0I组发病相关因素调查结果:POI组发病相关因素从高到低依次为:社会心理因素(35.11%)>个人因素(25.51%)>特发性因素(17.02%)=遗传因素(17.02%)>感染因素(12.77%)>手术因素(10.64%)>免疫因素(6.38%)>药物因素(1.04%)>环境因素(1.04%);亚临床POI组发病相关因素从高到低依次为:社会心理因素(51.2%)>特发性因素(33.72%)>个人因素(17.45%)>手术因素(16.3%)>免疫因素=遗传因素(7%)>感染因素(5.9%)>药物因素(1.16%)>环境因素(O%)。3.POI患者血浆差异表达的circRNA的筛选及验证研究结果:通过circRNA芯片技术检测出早发性卵巢功能不全患者及正常对照组血浆中circRNA的表达情况,筛选出差异表达的circRNA 35种,其中表达上调的有12种,表达下调的有23种;通过qRT-PCR技术对部分上述差异表达的circRNA进行验证,最终验证的结果表明hsacirc0000367在早发性卵巢功能不全中表达下调。结论:1.POI患者、亚临床POI患者确实存在体质偏颇,其中气虚质、阳虚质、阴虚质、血瘀质为POI的易感体质;阳虚质为亚临床POI的易感体质。且其中亚临床POI组阴虚质所占比例明显低于POI组,由此我们认为POI疾病进展过程的中医病机变化可能是疾病初期以脾肾阳气亏虚为主(功能不足),病情逐步进展,阳损及阴(物质亏虚),致终末阶段为阴阳俱虚(阴精亏虚为主)。2.早发性卵巢功能不全的发病相关因素与社会心里因素、个人因素、遗传因素、手术因素相关性较大。其中仍有大部分患者发病原因未明。3.筛选及验证POI患者血浆差异表达的circRNA,发现hsacirc0000367在早发性卵巢功能不全中表达下调,hsacirc0000367可能在早发性卵巢功能不全的发生过程中扮演着重要的角色。
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