糖尿病(diabetes mdlitus，DM)是以高血糖为特征的代谢棄乱性疾病，持续高的血液葡萄糖水平影响胰腺P-细胞正常功能，导致胰岛素的产生缺乏或者发展成为胰岛素抵抗，最终致使P细胞丧失功能，随之，血糖越不易控制，因此需要借助药物来控制血糖含量。糖尿病对患者的危害甚大，尤其是并发症，控制血糖水平也是预防并发症的重要措施。本课题以11型糖尿病为研究对象，拟通过建立新的二肽基肽酶IV(Dipeptidylpeptidase, DPPIV)、和a-葡萄糖苷酶（a-gliicosidase，GAA)抑制剂筛选模型并结合己有蛋白酷氨酸磷酸酶（Protein tyrosine phosphatase，PTPIB)模型，综合评价新驢特色植物中获得具有降糖活性的有效成分，寻找这三个祀点的抑制剂。DPPIV是近年研究糖尿病治疗途径的热点祀点，由于DPPIV具有降解调节降糖作用的胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1, GLP-1)与葡萄糖依赖性促胰岛素多肽（Glucosedependent insulinotropic polypeptide，GIF)的作用，因此，抑制剂可以阻止DPPIV这一行为使胰高血糖素样肽-1等顺利发挥其正常功效，从而达到降低血糖的目的。本研究采取从Caco-2细胞中获得DPPIV酶的方法，确定酶活体系最佳反应的温度37t：、反应时间30min、最佳底物浓度0.064mg/mL等，获得了更加经济有效的筛选模型，并从黑加企和路蛇剌各部位提取的18种提取物中筛选出有效抑制DPPIV酶的抑制剂。结果显示效果较好的抑制剂为黑加企BL2和BL5部位，其IC5G分别为133.43^ig/mLfP148.75^g/mLo酶获取方式的改变降低了成本，为方便快捷地进行大量抑制剂的筛选提供了可會邑。GAA是一种参与餐后血糖调节的酶，通过抑制剂作用降低酶活，有效阻止多糖降解为单糖从而减少血糖升高的可能性。本研究建立了转染的GAA-CHO细胞模型，从GAA-EGFP的劳光蛋白表达情况来反应植物提取物的抑制效果，即从细胞水平开展了对GAA抑制剂的筛选，降低了体外酶筛法获得的抑制剂在应用人体后效果差或者产生毒副作用的风险。通过筛选显示石植花提取物和黑加企BF2具有较好抑制作用，其IC50分别为0.887mg/mL和0.67mg/mL。另一祀点PTP1B是一种具有负反馈调控胰岛素信号功能的酶，近年PTP1B抑制剂成为了较有前途的抗糖尿病药物研究热点。通过药物抑制PTP1B酶的活性促进胰岛素信号通路的敏感性，可调节机体血糖水平。本研究首先，利用重组的PTP1B，通过体外酶筛法获得具有抑制PTP1B作用的黑加企BF2、石植花、玫瑰花提取物，它们的IC50分别为7.25呢/mL、102.23ng/mL、62.31ng/mL；其次，通过在CHO-K1细胞上观察它们对葡萄糖消耗的影响，发现它们具有促进细胞葡萄糖消耗的作用，由此，进一步深入研究抑制剂调节信号转导的作用机制。PTP1B抑制剂作用于CHO和L6细胞研究其作用机制，观察它们对信号通路中Ins-1、PDKK AKT、GSK-3p等蛋白磷酸化的影响。结果表明，三种活性成分都可影响信号通路中上述各蛋白的磷酸化表达情况，作用于细胞后胰岛素受体发生自身磷酸化并诱导胰岛素信号转导，磷酸化的胰岛素受体激活受体底物的磷酸化及下游信号元件的活性，^lAKT、GSK-3P等。P-Ins-1调节AKT活性必须先激活PI3K诱导下游PDK1发生磷酸化，磷酸化的PDK1相继激活下游AKT，被激活的AKT自身表达量减少而磷酸化的AKT表达量增加，活性AKT又调节下游信号分子GSK-3P的磷酸化水平增加，起到促进糖原合成作用。同时P-AKT有可能调控GLUT4易位的发生，推动葡萄糖的输出维持血糖稳态平衡。植物提取物作为降糖祀点抑制剂调节机体血糖的代谢，不但具有低毒性，生理条件更稳定等特点，还为合成更多新药的化学结构提供了理论基础。玫瑰花、石植花、黑加企、路蛇剌均是新驢特色的药用植物，资源丰富便于采集。采用植物化学方法分别获得其不同极性的提取物，通体外酶活筛选体系和分子生物学水平探讨它们降低二型糖尿病血糖功效。不仅有利于新驢特色植物资源合理利用，提升其使用价值和经济价值，还能为二型糖尿病药物研发做出贡献。