海洋细菌Vibrio agarivorans-2生长特性及产琼胶酶培养条件

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:phoebe_1012
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琼胶是一种从海洋红藻中提取出来的水溶性多糖,其主要成分为琼胶糖和硫琼胶,不仅应用于临床、生化、食品、医药等领域,且鉴于其不易被绝大多数微生物所降解的特性也作为实验室培养基载体被广泛应用。琼胶酶能够水解琼胶多糖,在海藻单细胞分离、酶解破壁制备原生质体中具有重要的价值,是海藻遗传工程的一种工具酶;并且,它在分子生物学方面也应用广泛。研究产生琼胶酶的海洋细菌具有应用价值和理论意义。本论文中菌株Vibrio agarivorans-2来自大连黑石礁沿海海域的石花菜,对其形态学特征、生理生化特征进行研究。产琼胶酶海洋细菌Vibrio agarivorans-2最适生长温度为28℃,最适生长pH值在7-8之间,兼性厌氧型,在2%-4%的NaCl浓度下生长良好,海水是比较适宜的培养基。通过单因素和响应曲面分析法优化产琼胶酶海洋细菌Vibrio agarivorans-2最佳发酵条件。单因素试验结果为:培养时间48 h,培养温度28℃,培养基初始pH值7.5,种子接入量8%,培养基装量为40 mL/100 mL,摇床转速为160 r/min,应注意尽量减少不必要传代。响应面分析得到最佳发酵条件为:培养时间46.8 h,培养基初始pH值7.4,摇床转速为167 r/min。进行酶活性质的初步探究,得出该酶在20-40℃之间有较好的稳定性,在此范围内菌株正常代谢产酶,在高于50℃的条件下酶活力迅速丧失,在60℃的条件下酶活力基本丧失。该菌株在pH值为7-8时有较好的稳定性,当反应体系的pH超出此范围,向酸或碱方向移动时,酶活力迅速丧失。
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