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根结线虫(Meloidogyne spp.)是农作物的主要病原物,寄生范围广,危害重,严重威胁着农业生产的持续发展。在辣椒中已经明确存在着多个抗线虫基因及防御线虫的基因。辣椒HDA149为抗线虫DH系列材料,通过抑制性消减杂交我们从辣椒HDA149中分离到了根结线虫诱导表达的抗线虫EST片段CaMe,并且通过RACE技术克隆到了基因的全长(登录号FJ231739),最大开放阅读框为3600bp,编码1199aa的蛋白,含有NBS-LRR结构域。通过RT-PCR验证表明该基因在根结线虫侵染后的根尖和心叶中表达量很高,且没有显著的差别;在嫩茎表达量明显减少,而花蕾、幼果中只有很微量的表达。通过Nothern杂交证实CaMe基因的表达与根结线虫侵染紧密相关,在接种根结线虫6h时CaMe基因即可表达,在12h时明显加强,并且在24、36h时依然保持着较高的表达量,在72h时表达量降低。在根结线虫侵染后的根尖组织通过显微观察可以看到在根结线虫周围的寄主细胞具有过敏性坏死反应。通过该基因的保守区和特异区进行的两个EST片段构建的TRV-CaMe基因敲除载体对CaMe基因进行表达沉默,证明在CaMe基因表达沉默后,辣椒HDA149上的根结和卵块数量极显著的增加,由抗根结线虫病转变为感病,因此初步的推断CaMe基因为辣椒HDA149中表达的抗线虫基因。辣椒Carolina Wonder为抗根结线虫材料,我们通过SSH技术在根结线虫侵染后的根尖组织中分离到了CaSn基因的片段,并且通过RACE技术克隆到了基因(登录号EU627185),基因全长653bp,最大开放阅读框为315bp,编码含104aa的蛋白,属于Snakin第二亚家族蛋白。通过蛋白结构预测显示该基因前端具有信号肽,且为分泌型的成熟蛋白大小为66aa。并且通过原核表达系统证实CaSn基因编码蛋白可以体外表达。RT-PCR证实CaSn在茎尖中的表达量最大,其次是在根尖和叶片中,而在茎、花和果中表达量很低。CaSn编码蛋白CaSnakin与根结线虫的侵染紧密相关,在根结线虫侵染6h时即可表达,12h时表达量显著增加,并且以后的根结线虫侵染过程中一直保持着较高的表达量。通过TRV介导的基因沉默作用证明沉默CaSn基因后辣椒上的根结和卵块数量显著的增加,因此初步的推断CaSn基因为辣椒Carolina Wonder中参与防御根结线虫作用的基因。