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目的:免疫微环境的干预和重塑正成为研究热点,微环境中的巨噬细胞可以促进肿瘤的增殖转移,肿瘤细胞来源的外泌体作为细胞间交换的媒介,携带的内容物可以激活巨噬细胞M2型极化,促进肿瘤细胞的生长,因此抑制肿瘤细胞源外泌体的功能,可以减少肿瘤细胞与巨噬细胞间的联系,从而抑制肿瘤细胞的增殖转移。益气解毒方是李雁教授长期临床应用的经验方,具有抑制肺癌细胞生长、调节机体免疫的功效,但是该方及其有效组分血根碱对肺癌细胞源外泌体的干预作用尚未明确。本研究旨在探索益气解毒方及其有效组分血根碱通过调控肺癌细胞源外泌体功能抑制巨噬细胞促进肺癌增殖转移的作用及可能的机制。方法:（1）收集人肺癌A549细胞上清液,使用Exo Quick-TC试剂盒提取外泌体,使用透射电子显微镜（Transmission electron microscopy,TEM）观察外泌体的外在形态、大小,使用纳米微粒跟踪分析（Nanopartical tracking analysis,NTA）检测外泌体的浓度及粒径分布,Western-Blot实验检测外泌体标志蛋白CD63、Alix、TSG101以及分子伴侣蛋白calnexin的表达。（2）使用细胞膜绿色荧光染料Dio给外泌体染色,然后将标记的外泌体与人单核细胞白血病细胞（THP-1细胞）共孵育24h,激光共聚焦显微镜观察THP-1细胞吞噬外泌体的情况。（3）将益气解毒方干预后的外泌体与THP-1细胞（此前,THP-1细胞（5×10~5）接种于6孔板中12小时）共同培养24小时（外泌体终浓度为200μg/ml）,更换新鲜培养基继续培养24小时,收集上清液。将收集到的不同组别的上清液与培养基1:1混合,得到不同条件培养基作用于肺癌细胞,分别做CCK-8实验、平板细胞克隆形成实验测细胞的增殖,划痕实验、Transwell迁移实验测细胞的迁移,Transwell侵袭实验测细胞的侵袭。（4）将益气解毒方干预后的外泌体与THP-1细胞（此前,THP-1细胞（5×10~5）接种于6孔板中12小时）共同培养24小时或12小时（外泌体终浓度为200μg/ml）,收集THP-1巨噬细胞,使用Western-Blot实验检测P-P65和P65蛋白的表达,使用RT-PCR实验检测基因IL-6、TNF-α、CCL2的表达。（5）将益气解毒方有效组分血根碱与肺癌细胞共培养24、36、72小时,用CCK-8试剂盒于多功能酶标仪下测其OD值,观察不同浓度血根碱对肺癌细胞生长的影响。（6）用4μM血根碱处理人肺癌A549细胞,从A549细胞上清液中提取外泌体,将外泌体加入THP-1细胞,收集THP-1细胞的上清液与A549细胞共培养。CCK-8实验、平板细胞克隆形成实验测细胞增殖,划痕实验、Transwell迁移实验测细胞迁移,Transwell侵袭实验测细胞侵袭,细胞凋亡实验测细胞凋亡。Western-Blot实验测相关蛋白的表达,RT-PCR实验测相关基因的表达。（7）用NF-κB抑制剂提前2小时预处理THP-1巨噬细胞,将提取的外泌体加入预处理后的巨噬细胞中,然后与A549细胞共培养,采用CCK-8实验、平板细胞克隆形成实验测细胞增殖,划痕实验、Transwell迁移实验测细胞迁移,Transwell侵袭实验测细胞侵袭,细胞凋亡实验测细胞凋亡。结果:（1）透射电子显微镜可以观察到该囊泡具有典型的杯状结构,呈茶托状;经NTA检测,粒径分布范围50-200nm,其平均粒径为138.4nm,平均浓度为8.3×1010Particles/m L;Western-Blot实验检测显示外泌体标志蛋白CD63、Alix、TSG101表达,分子伴侣蛋白calnexin不表达,证明所提取物质是外泌体。（2）激光共聚焦显微镜显示外泌体被THP-1细胞摄取。（3）与对照组比较,肺癌细胞源外泌体作用于THP-1细胞后,可促进A549细胞的增殖、迁移、侵袭,上调THP-1细胞P-P65蛋白表达,上调THP-1细胞IL-6、TNF-α、CCL-2基因的表达;与对照组比较,益气解毒方干预后的外泌体,能抑制THP-1细胞促进A549细胞增殖、迁移、侵袭的作用,下调THP-1细胞p-P65蛋白的表达,下调THP-1细胞IL-6、TNF-α、CCL-2基因的表达。（4）与对照组比较,益气解毒方有效组分血根碱干预后的外泌体,能抑制THP-1细胞促进A549细胞增殖、迁移、侵袭的作用,促进A549细胞的凋亡,下调THP-1细胞P-P65蛋白的表达,下调THP-1细胞IL-6、TNF-α、CCL-2基因的表达。（5）与对照组比较,NF-κB抑制剂干预THP-1细胞后,肺癌细胞源外泌体作用于THP-1细胞可抑制A549细胞的增殖、迁移、侵袭,下调THP-1细胞P-P65蛋白表达,下调THP-1细胞IL-6、TNF-α、CCL-2基因的表达。益气解毒方及其有效组分血根碱功能与NF-κB抑制剂相同,证明其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。结论:（1）肺癌细胞源外泌体可通过作用于THP-1细胞,促进肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其机制可能与NF-κB信号通路有关。（2）益气解毒方及其有效组分血根碱可通过作用于外泌体,抑制THP-1细胞促进A549细胞增殖、迁移、侵袭的作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。