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目的：建立大脑皮层器官型脑片的氧糖剥夺模型（Oxygen andGlucose Deprivation,OGD），并在此基础上观察正丁基苯酞（NBP）对细胞凋亡和线粒体电位的影响。方法：选择出生后5-7天（P5-7）的SD(Sprague Dawley)乳大鼠，制备大脑皮层运动区的器官型脑片，采用膜插件的方法进行体外培养，观察其形态，并分别于1w，2w，3w，4w时间点进行SMI-32染色，观察其中的锥体细胞发育并进行计数。2周后，随机分为对照组（C组）和实验组（T0，T0.01，T0.1，T1，T10组），每组九片，更换含Propidium iodide（PI，1μg/ml）的培养液，孵育20min，倒置荧光显微镜下拍照（4X，曝光时间1.038ms，灵敏度ISO1600）后T组采用厌氧罐氧剥夺，更换无糖培养液（含PI）的方式，进行OGD干预30min，后依次更换含不同剂量NBP（0，0.01，0.1，1，10μM）的正常糖含量培养液（含PI），C组与T组同一时间更换正常培养液。分别在干预前和恢复正常条件1小时后，观察PI染色。并根据实验结果，选择T0组和T10组，分别在不同时间点(OGD30min，NBP1h，24h，72h，7d)同样条件下拍照。另外C组和T组，进行OGD和NBP干预（培养液不添加PI），于1h进行JC-1线粒体检测试剂盒检测线粒体膜电位的变化。结果：1脑片在体外培养存活良好，无明显的坏死区域，镜下观察可见脑片体积逐渐增大，变薄，透光度增加，皮层和皮层下结构分界清晰，1、2、3、4周的脑片，进行SMI-32免疫组化染色，可见SMI-32阳性的细胞排列整齐，每个细胞有一个长的顶树突伸向皮层，并维持稳定的数目；2OGD前后PI染色荧光强度值有明显变化，并在恢复正常糖氧供应条件后，仍有持续增强，在72h和7d时的观察值明显的升高，各时间点之间及与正常对照组相比均存在明显差异，差异具有统计学意义（P<0.05）；3器官型脑片OGD30min后，对照组（C组）和实验组（T0，T0.01，T0.1，T1，T10组），PI染色可见不同亮度的红色荧光，与正常对照组相比，实验组各亚组的荧光强度均大于对照组，各组红色荧光强度依次增强，与NBP浓度（0-10μM范围内）呈负相关，实验组与对照组及实验组各亚组之间差异均有统计学显著性（P<0.05）；4T0组和T10组，分别观察不同时间点（OGD30min，NBP+再灌注1h，24h，72h，7d）PI染色，可见两组在OGD30min后均出现了明显的细胞凋亡，两组无显著性差异。T0组随时间的延长细胞凋亡明显增加，在72h和7d时的观察值明显的升高。然而NBP组随时间的延长，PI染色逐渐减少，各组之间的差异均具有统计学意义（P<0.05）；5对照组（C组）和实验组（T0，T0.01，T0.1，T1，T10组）（培养液不添加PI），JC-1线粒体检测试剂盒染色可见OGD30min，复氧复糖1h后，红色荧光/绿色荧光（R/G）的值明显减小，R/G的值与NBP浓度呈正相关，实验组各亚组的R/G的值均小于对照组，实验组与对照组及实验组各亚组之间差异均有统计学显著性（P<0.05）；结论：1SD大鼠P5-7乳鼠可以作为体外脑片培养的供体；2体外培养的大脑皮层器官型脑片具有与体内类似的细胞结构，锥体细胞分布，可以作为研究外界刺激对皮层神经元影响的各种模型制作的平台；3OGD模型操作方便，能够诱导脑片损伤，出现细胞的急性死亡和迟发性凋亡，模拟了缺血性脑损伤的病理变化，重复性良好；4NBP对缺血性脑损伤导致的急性和迟发性细胞凋亡均具有保护作用，且有明显的量效关系，但不能完全阻断这两种凋亡的发生；5脑片损伤后线粒体电位的耗散在早期已经出现，与迟发性细胞凋亡的发生相关，NBP对线粒体电位的耗散有阻止作用，且与NBP浓度存在量效关系。