DANCE作为体内外细胞的病理反应及其机制的研究

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目的:我们的前期研究发现,DANCE(Density Alteration in Non-physiological Cells)反应是一种普遍存在的生命现象,包括体外培养的人细胞株、小鼠体内组织细胞、大肠杆菌和白色念珠菌等;本研究以体外培养的细胞/细菌和肾上腺素诱导的小鼠急性肺水肿模型为实验对象,研究病理条件下体内外细胞/细菌发生的DANCE反应及其机制。方法:通过改变体外培养的细胞/细菌的培养条件以及应用药物干预方法,测定细胞/细菌的体外DANCE反应;分别收集正常昆明小鼠的肝脏和肺组织各细胞条带进行HE染色,镜下观察各条带的组分及其组织细胞的形态变化;测定小鼠肝脏和肺组织细胞的DANCE反应;测定小鼠的肺湿重/肺干重比值;制备小鼠肺组织病理切片;应用蒽酮法测定小鼠肝糖原含量;应用Quantitative Real-time PCR测定肾上腺素不同剂量和不同作用时间对小鼠肝脏细胞IL-1β和IL-6的m RNA表达水平的影响;分析各实验结果与小鼠肝脏和肺组织细胞DANCE反应的关系。结果:正常培养的细胞/细菌经DSGC离心后,均可分离出具有不同密度的细胞条带;在培养条件改变和药物的作用下,细胞条带的数目或含量都会发生改变;正常昆明小鼠经HE染色,镜下可见肺和肝脏的组织匀浆各DSGC分离条带主要由细胞团和组织碎片组成;小鼠肝脏和肺细胞发生DANCE-DOWN反应,且这种DANCE反应对肾上腺素的给药剂量和作用时间具有明显的依赖性;肺的DANCE反应概率在给药2小时和6小时出现两个高峰,而肝脏则在1小时和8小时出现两个高峰;小鼠肺组织细胞的DANCE反应概率和肺湿重/肺干重比值之间具有明显的相关性;肺组织细胞发生DANCE反应的小鼠,镜下可见其肺组织切片中有明显的血细胞积聚现象;急性肺水肿小鼠肝糖原含量在给药1小时出现一个低谷,但在8小时出现一个高峰;肝脏细胞中IL-1β和IL-6的m RNA相对表达量与肝脏组织细胞的DANCE反应概率具有明显的相关性,在注射肾上腺素1小时后达到高峰。结论:体外细胞和细菌/真菌在培养条件改变或药物作用下可发生DANCE反应,是细胞和细菌/真菌发生病理生理变化的一种反映;肾上腺素所致急性肺水肿可引起小鼠肝和肺组织细胞的DANCE反应,其反应概率与药物剂量和作用时间有关,且伴有肝脏细胞IL-1β和IL-6的m RNA水平升高,因此,肝和肺组织细胞的这种DANCE改变是机体对肾上腺素所致急性肺水肿的一种病理反应。由肾上腺素引起的,细胞因子介导的体内应激性炎症性反应、肝脏细胞代谢(如糖原代谢)模式改变、肺内压过高造成肺组织细胞受挤压、肺循环异常造成肺组织“淤血”等病理变化,可能是导致这种体内DANCE反应的机制。
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