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目的:牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）是慢性牙周炎重要的可疑致病菌,并且可内化入各种宿主细胞内,进而参与全身性疾病的发生和发展过程。骨化三醇（1α,25-二羟维生素D3,1α,25（OH）2D3,以下简称1,25D）可通过促进自噬降低上皮细胞和单核细胞内P.gingivalis的数量。本研究进一步观察1,25D对内化于U937巨噬细胞P.gingivalis活菌数量的影响,并通过观察U937巨噬细胞内P.gingivalis与自噬体和溶酶体的共定位情况,U937巨噬细胞自噬形成情况等进一步探讨1,25D对U937巨噬细胞内P.gingivalis的作用和相关机制。方法:1、PMA诱导U937单核细胞系为巨噬细胞。2、抗生素保护法建立P.gingivalis内化U937巨噬细胞研究模型。3、RT-PCR法检测1,25D对内化U937巨噬细胞内P.gingivalis活菌数量的影响。4、1,25D及P.gingivalis对U937巨噬细胞自噬的影响。分别用P.gingivalis、1,25D及1,25D与P.gingivalis联合处理U937巨噬细胞。Western Blot方法检测LC3（Microtubule-associated protein 1light chain 3）蛋白和p62蛋白表达水平。5、激光共聚焦显微镜观察自噬体标志物LC3表达情况、P.gingivalis与LC3共定位情况以及P.gingivalis与溶酶体标志物LAMP1（Lysosomal-Associated Membrane Protein 1）共定位情况。6、3-Methyladenine（3-MA）抑制自噬后RT-PCR法检测1,25D对U937巨噬细胞内P.gingivalis活菌数量的影响。结果:1、1,25D以剂量依赖性降低U937巨噬细胞内P.gingivalis活菌数量（P<0.05）。2、P.gingivalis和1,25D对U937巨噬细胞自噬的影响:（1）P.gingivalis内化U937巨噬细胞模型18 h后,LC3-II蛋白表达量随着MOI值升高而升高（P<0.05）,p62蛋白表达量逐渐下降（P<0.01）。（2）1,25D以剂量和时间依赖性促进U937巨噬细胞LC3-II蛋白表达（P<0.05）,降低p62蛋白表达（P<0.05）。（3）1,25D与P.gingivalis联合处理U937巨噬细胞18 h,LC3-II蛋白表达量显著增加（P<0.01）,p62蛋白表达显著减少（P<0.01）。3、与P.gingivalis内化U937巨噬细胞相比,1,25D处理P.gingivalis内化U937巨噬细胞LC3斑点数量显著增加（P<0.05）,同时P.gingivalis与LC3和LAMP1共定位率显著增加（P<0.05）。4、抑制自噬后1,25D对巨噬细胞内P.gingivalis数量的抑制作用明显下降（P<0.01）。结论:1,25D促进U937巨噬细胞内P.gingivalis与LC3及LAMP1的共定位,进而降解内化U937巨噬细胞内P.gingivalis;同时,1,25D通过增强自噬降低U937巨噬细胞内P.gingivalis活菌数量。