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目的:研究铜绿假单胞菌菌毛蛋白PilA的C端部分碱基是否对PilA诱导IL-1β产生具有重要影响,为阐明PilA诱导IL-1β产生的关键氨基酸位点提供基础,以期最终能为研发新药提供准确的靶点。方法:1、根据铜绿假单胞菌模式菌株PAO1的菌毛蛋白基因pilA的序列,通过PCR扩增pil A和其C端缺失124bp的片段,再将PCR扩增片段连接到质粒pET-41a(+)上,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,利用IPTG诱导,使之表达出全长PilA蛋白(PilA-FL,含GST标签蛋白)和C端部