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膀胱镜检查和尿脱落细胞学检查是目前筛选和诊断膀胱癌的基本方法。然而膀胱镜检查具有创伤性,尿脱落细胞学检查的敏感性较低,因此寻找一种非创伤性的、敏感性高的检查方法对膀胱癌早期诊断是一个重要的课题。细胞角蛋白是上皮细胞发生、分化、成熟过程中逐渐形成的,是所有哺乳类动物细胞骨架的中间丝之一。细胞角蛋白20(CK20)是细胞角蛋白的一种,它具有严格的上皮细胞分布。主要分布在胃粘膜表层上皮细胞、十二指肠绒毛上皮细胞、结直肠粘膜上皮、尿路(肾盂、输尿管、膀胱)粘膜表层细胞、表皮的Merkel细胞,并特异地存在于这些上皮起源的肿瘤细胞中。作为一种新的膀胱肿瘤标记物,通过检测CK20的表达来研究移行细胞癌已成为目前的热点之一。目的 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCK)检测膀胱移行细胞癌患者尿中脱落细胞,研究尿脱落细胞中CK20的表达,探讨其在膀胱癌的诊断及术后监测方面的临床意义。方法 实验1应用RT-PCR方法检测45例术前膀胱癌患者以及18例非肿瘤患者的尿脱落细胞CK20的表达。实验2应用FQ-PCR方法,以GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)为内对照,检测67例膀胱癌患者尿脱落细胞CK20的表达。实验3对139例行膀胱肿瘤电切术或膀胱部分切除术的膀胱移行细胞癌患者术后应用RT-PCR方法检测尿脱落细胞第四军医大学硕士学位论文CKZO的表达。结果实验1中45例膀胧癌39例CK20表达阳性,非肿瘤组18例中1例CK20表达阳性,RT-PCR方法检测膀肤癌尿脱落细胞中CK20敏感度867%,特异度94.4%。Gl、GZ及G3膀肤癌阳性率分别为82.8%(24/29)、91.7%(11/12)、100.0%(4/4),各级间差别无显著意义(p>0.05)。CKZO的表达同肿瘤的分期、分级无关。实验2中高分级、分期膀肤癌CKZO表达量明显高于低分级、分期膀胧癌,经t检验结果显示不同分级及分期膀脱癌组间CK20表达量和C心0/G APnH有显著性差异(P<0.05),G”nH在3组间均无显著性差异(P>.05)。实验3中139例患者共有43例于随访过程中复发。CK20表达阳性患者为45例,其中38例患者CKZO表达阳性时膀肤镜检查肿瘤复发,有3例CKZO表达阳性时膀肤镜检查未见复发,但3一6月后出现肿瘤复发。另有4例CK20表达阳性而随访至今未见肿瘤复发,另有2例患者出现肿瘤复发但CK20表达阴性。结论CKZO是一种较为理想的膀肤肿瘤标记物,Rl’- PCR方法检测膀肤癌尿液中CKZO敏感度和特异度均较高,在膀肤癌术后随访中CK20表达与肿瘤的复发具有很高的一致性。但在诊断及术后监测中其是否可能(或在某种程度上)代替膀耽镜检查还需进行标准化前瞻性的多中心试验加以论证。