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本研究应用MTT法和反相高效液相-荧光分光光度法(HPLC),研究葫芦素B联合阿霉素对肝癌细胞系HepG2和H22的作用,为临床上改善肝癌治疗,逆转肝癌多药耐药提供依据。
材料和方法:
不同浓度葫芦素B单独或联合阿霉素作用于HepG2及H22细胞一定时间后,利用MTT法检测计算细胞增殖抑制率并探讨两者联合是否具有增强作用,采用反相高效液相-荧光分光光度法检测葫芦素B对阿霉素在HepG2细胞中内流和外排的影响。
结果:
1、MTT法实验结果显示,葫芦素B与阿霉素联合应用,与单独使用阿霉素相比,对HepG2及H22细胞的增殖抑制作用明显增强。经单因素方差分析,有统计学意义。经LSD-t检验,联合用药组与单药组之间、高剂量组与低剂量组之间的差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01)。
2、HPLC法测定HepG2和H22细胞内流入和泵出的阿霉素药量结果显示,不同浓度葫芦素B联合阿霉素用药组与单独应用阿霉素用药组相比,细胞内阿霉素浓度明显增加。经单因素方差分析,有统计学意义。经LSD-t检验,联合用药组与单药组之间、高剂量组与低剂量组之间的差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01)。
结论:
1、葫芦素B和阿霉素联合应用共同抑制HepG2及H22细胞的增殖,作用较单药明显。
2、葫芦素B促进阿霉素在肝癌细胞HepG2及H22中的内流,抑制阿霉素在其中的外排,因此提高阿霉素在肝癌细胞HepG2及H22中的浓度,从而增强其抗肿瘤活性。其作用呈浓度和时间依赖性。