论文部分内容阅读
背景: 众所周知,平滑肌细胞的迁移在动脉粥样硬化的发生发展过程中占有举足轻重的地位,而氧化低密度脂蛋白则与动脉粥样硬化的起始密切相关。最近已有研究表明氧化低密度脂蛋白是诱导血管平滑肌细胞增生及迁移的重要危险因素,但其具体机制尚未完全阐明。神经系统与血管系统其实有很多相似之处,它们同样复杂及形成了全身网络,多年来许多科学家都致力于寻找连接两大看似独立的网络体系的因子。轴突诱向因子-1(Netrin-1)是一种神经导向因子,在神经轴索发育过程中朝着靶细胞及组织的迁移及定位过程中起着相当重要的作用,而在最近的研究中表明它与除开神经系统外的多种细胞的迁移密切相关,其中包括单核巨噬细胞、中性粒细胞及平滑肌细胞。因此我们推测:氧化低密度脂蛋白可以刺激平滑肌细胞表达netrin-1从而影响其迁移能力。与上述假说一致的是:已有研究证明用氧化低密度脂蛋白干预巨噬细胞的条件培养基可以诱导人血管平滑肌细胞的迁移。由此推测:氧化低密度可以刺激平滑肌细胞分泌netrin-1,并直接影响其迁移能力。 目的: 探讨ox-LDL影响平滑肌细胞迁移能力是否与netrin-1直接相关。 方法: 培养原代大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,以ox-LDL(50mg/l)干预原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞为干预组,以不加干预为对照组,干预24小时后分别提取总RNA及蛋白通过实时荧光定量PCR(Real-time polymerase chain reaction)比较各组中netrin-1基因的相对表达量,再通过免疫印迹(Western Blot)方法检测各组中netrin-1的蛋白表达量。以netrin-1蛋白(250ng/ml)干预原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞为干预组,以不加干预为对照组,干预48小时后种于transwell小室内,于16小时后测定各组细胞的迁移率。 结果: 1.与对照组相比oxLDL可促进原代大鼠血管平滑肌上netrin-1基因的表达,其变化有统计学差异(P<0.05)。 2.与对照组相比oxLDL可促进原代大鼠血管平滑肌上netrin-1蛋白的表达,其变化有统计学差异(P<0.05)。 3.与对照组相比netrin-1蛋白可直接促进原代大鼠血管平滑肌的迁移,结果有统计学差异(P<0.05) 结论: OxLDL能上调大鼠原代血管平滑肌细胞上netrin-1基因及蛋白的表达,并且netrin-1能直接促进血管平滑肌的迁移能力,提示oxLDL可能通过netrin-1促进血管平滑肌的迁移。