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目的探讨胃饥饿素(ghrelin)对成骨细胞诱导的影响,同时探讨PI3K/Akt信号通路在其中发挥的作用。方法选择小鼠成骨前体细胞MC 3T3-E1为研究对象,培养并于显微镜下观察细胞生长形态及其变化。分别将不同浓度的胃饥饿素(0μmol/L、0.05μmol/L、0.10μmol/L)加入细胞培养基中孵育,采用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖活性;碱性磷酸酶测定试剂盒检测细胞的碱性磷酸酶活性;Western blot方法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达变化。根据上述实验方法所得的实验数据应用统计分析软件SPSS 22.0进行分析,应用制图软件Graphpad Prism 5进行作图。组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)在显微镜下观察细胞,可见细胞贴壁生长,呈现出纺锤形、三角形、多角形等不规则形态,且细胞间可通过长短不一的树突相互连接,符合成骨细胞系生长的形态学特征,实验组与对照组相比较,加入饥饿素后细胞生长更快,且在一定浓度范围内,饥饿素浓度越高,细胞生长越快。(2)应用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖活性,发现加入不同浓度的饥饿素后,与对照组相比,饥饿素对细胞增殖有促进作用(P<0.05),且在一定浓度范围内,随着饥饿素浓度梯度的增加,饥饿素对细胞增殖的作用亦有所增加(P<0.05),本实验中,0.10μmol/L的饥饿素促细胞增殖能力更强。(3)应用碱性磷酸酶测定试剂盒检测细胞的碱性磷酸酶活性,发现加入不同浓度的饥饿素后,与对照组相比,各组细胞碱性磷酸酶活力均有所增加(P<0.05),且在一定浓度范围内,随着饥饿素浓度梯度的增加,细胞碱性磷酸酶活力也有所增加(P<0.05),本实验中,0.10μmol/L的饥饿素升高碱性磷酸酶的活力更明显。(4)应用Western blot方法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的表达变化,发现加入不同浓度的饥饿素后,与对照组相比,各组PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt等PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达均有所增加,且在一定浓度范围内,随着饥饿素浓度梯度的增加,蛋白表达水平也有所增加。结论(1)在显微镜下观察细胞,可见细胞贴壁生长,呈现出纺锤形、三角形、多角形等不规则形态,且细胞间可通过长短不一的树突相互连接,符合成骨细胞系生长的形态学特征。(2)饥饿素可以促进成骨前体细胞3T3-E1的增殖以及分化能力,并且一定浓度范围内,随着饥饿素浓度的升高,增殖、分化能力随之增加。(3)饥饿素可以通过PI3K/AKT信号通路影响成骨前体细胞3T3-E1的增殖及分化,在蛋白水平上,PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达均与饥饿素浓度水平相关,且在一定浓度范围内,随着饥饿素浓度梯度的增加,蛋白表达水平也有所增加。