福建省是我国食用菌产量和栽培技术最高的省份之一,近些年随着国家加大对农业现代化的支持,食用菌工厂化栽培已成为未来发展的一个趋势。但是福建省食用菌从业者大多是知识水平偏低的劳动人民,对食用菌的品种保护和品种权不重视,甚至都不知道自己栽培的是什么品种,这严重制约了福建省食用菌产业的发展,为了解决福建省食用菌商业栽培菌种所面临的同种异名和同名异种等菌种混乱问题,本实验进行了如下几个方面的研究:1对于待鉴定样品数量大,本研究在真菌菌丝体DNA提取的常规CTAB法的基础上,建立了一种快速小剂量真菌菌丝体DNA提取法,该方法能够在2.5h内完成DNA的提取,所需样品和试剂较少,操作简单。我们对子实体中DNA的提取进行了优化,发现在含有4%CTAB的抽提液、抽提时间50 min和含有1%CTAB的调解液条件下,能从子实体中得到适合分子标记实验的DNA同时我们也对栽培料中DNA的提取进行了探讨。2本实验在国家行业标准食用菌菌种真实性鉴定RAPD法和ISSR法的基础上,增加了 ITS-RFLP、SRAP和SCAR分子实验,以增强品种鉴定的准确性。筛选到了用于鉴定香菇菌株的11个分子标记,同时得到鉴定木耳菌株的11个分子标记、秀珍菇菌株的8个分子标记、茶树菇的10个分子标记、双孢蘑菇的9个分子标记。木耳样品的ITS-XbaI酶切结果表明待鉴定样品分为毛木耳和黑木耳两类,ITS-Hind Ⅱ酶切把茶树菇样品分为两类两类之间的关系有待研究,双孢蘑菇样品的ITS-HaeⅢ酶切结果将待鉴定样品分为5类。3对于RAPD、ISSR和SRAP分子标记实验的稳定性和可行性,本实验在相同的PCR反应程序和体系下以同一批次提取的香菇、毛木耳、秀珍菇、茶树菇和双孢蘑菇的DNA为模板分别在-20℃存放1d、4d、7d、10d后进行PCR实验,结果表明特异条带的重复性和清晰度上都很好。4本实验以三明真菌研究所、福建农林大学菌物研究中心、福建省农业科学院食用菌研究所等研究机构来源清晰的菌株为标准菌株,与待鉴定菌株同时进行实验,以订正错误的品种名称。5采用人工绘制品种鉴别树(MCID)的分析方法,绘制了 234个香菇菌株的CID示意图,将香菇菌株分为16类,结果表明福建省主栽的品种是庆科20,L66,L26和L808。92个毛木耳木耳菌株的CID示意图将毛木耳菌株分为7类,结果表明福建省主栽的毛木耳品种是毛木耳43和781。15个黑木耳菌株的CID示意图将黑木耳菌株分为5类,其中一类为Au8129。71个秀珍菇菌株的CID示意图将秀珍菇菌株分为10类,结果表明福建省主栽的品种是台湾秀珍菇和秀迪,ITS片段大小表明编号为41的菌株非秀珍菇菌株。76个茶树菇菌株的CID示意图将茶树菇菌株分为1 1类,结果表明福建省主栽的品种是古茶2号。47个双孢蘑菇菌株的CID示意图将双孢蘑菇菌株分为10类,结果表明福建省主栽的品种是AS2796。这种CID示意图将鉴别食用菌品种的依据和结果很简洁的展现出来,为后续福建省食用菌品种的认定提供技术支持。