GP73对肝细胞肝癌细胞系增殖和转移的机制研究

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目的高尔基体磷酸化蛋白2 (GOLPH2/GP73)是一种在肝癌细胞中高表达的高尔基体膜蛋白,作为一种精准的肿瘤标志物,被用于指示肝肿瘤的发病进程。虽已有报道指出GP73和肝癌增殖有相关性,但具体机制仍不清楚。本研究拟阐述GP73参与的肝细胞肝癌增殖及迁移和侵袭过程的具体调控机制。方法1.利用GP73特异性siRNA沉默HepG2、SMMC-7721以及Huh7细胞系的GP73基因表达。2.采用MTS、软琼脂克隆实验对三种肝细胞肿瘤细胞系增殖水平进行检测,并通过移植瘤抑制实验进一步在体内证明干扰GP73对肿瘤增殖的影响。3.通过免疫印迹测定增殖和细胞周期信号相关通路蛋白,并使用流式细胞术测定细胞周期。4.通过Transwell迁移和侵袭实验、细胞免疫荧光和免疫印迹测定GP73对肿瘤迁移和侵袭的影响以及对N-钙粘蛋白和E-钙粘蛋白表达的影响。结果1.干扰GP73会降低肝细胞肝癌细胞体外和体内增殖。2.干扰GP73会降低肝细胞肝癌细胞中p-Rb表达量。3.干扰GP73对肝细胞肝癌细胞的细胞周期无影响。4.干扰GP73会降低肿瘤迁移和侵袭能力,并上调N-钙粘蛋白和E-钙粘蛋白的表达量。结论GP73可通过调控p-Rb、N-钙粘蛋白和E-钙粘蛋白的表达量,促进肝细胞肝癌细胞迁移和侵袭,从而进一步影响细胞增殖。
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