目的:在评价加味蜂房丸预防和治疗乳腺癌动物实验的基础上,通过网络药理学方法探讨其防治乳腺癌的分子机制;人工麝香作为制剂中天然麝香的人工替代品,为全面控制制剂质量,本文建立了柱前衍生化HPLC法测定麝香酮的含量测定方法。方法:利用7,12-二甲基苯蒽(DMBA,100 mg/kg)构建大鼠乳腺癌模型并使用加味蜂房丸进行干预,观察不同干预组大鼠的体重、死亡及肿瘤发生情况,检测不同干预组大鼠外周血中雌激素水平;在中药数据库TCMSP,台湾中医药资料库TCM@TANWAN,及中国知网检索加味蜂房丸11种中药材的单体化合物,将这些单体化物上传到Swiss及Superpred网站预测这些单体化合物的靶点,构建“中药材-单体化合物-靶点”网络;分析种属为人的乳腺癌转录组测序数据,筛选与乳腺癌相关的靶点;在加味蜂房丸靶点与乳腺癌靶点之间取交集,得到加味蜂房丸能够干预的乳腺靶点;在DIVID数据库分析上述靶点的功能以研究加味蜂房丸保护乳腺癌的分子机制;采用2,4-二硝基苯肼柱前衍生化高效液相法,测定无水乙醇、硅藻土乙酸乙酯、无水硫酸钠乙酸乙酯3种不同提取工艺中麝香酮含量,确定麝香酮最佳提取方法并进行麝香酮含量检测。结果:药效学研究实验结果表明,中药加味蜂房丸可以影响乳腺癌大鼠体重增长,对DMBA诱导的大鼠体重减轻起到保护作用,降低DMBA诱导的乳腺癌大鼠死亡率,减小乳腺癌大鼠肿瘤直径,调节实验组大鼠雌激素及孕酮水平;网络药理学分析表明,中药加味蜂房丸中柴胡、半枝莲等化合物能够调控与乳腺癌相关的靶点蛋白,主要调节CDK2、VEGFA、PLK1、MMP9等乳腺癌相关蛋白表达,影响p53信号通路、蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性等信号通路,调控细胞周期,激素水平,氧化还原酶活性及代谢通路,对乳腺癌细胞增殖,转移、肿瘤新生血管形成等方面产生影响;柱前衍生化高效液相法检测结果表明,最佳提取方法为无水硫酸钠乙酸乙酯提取法,DNPH衍生化法测定麝香酮含量中回归系数R~2>0.999,线性良好,低、中、高浓度的回收率符合试验标准,RSD<10%,重复性良好,RSD<10%,室温放置下稳定,RSD<5%,不同批次中药加味蜂房丸中的麝香酮含量分别为17.59μg/g,17.15μg/g,17.27μg/g,RSD<10%。结论:中药加味蜂房丸通过调节乳腺癌大鼠体内雌激素及孕酮水平,对大鼠荷瘤情况产生影响,降低乳腺癌癌前病变的发生,通过多途径多靶点的作用方式,影响乳腺癌细胞周期及增殖侵袭能力,采用高效液相法测定麝香酮含量,为加味蜂房丸临床用药提供实验依据。