环孢素(CsA，cyclosporin A，CsA)系含11个氨基酸的环状多肽，是一种选择性免疫抑制剂，具有高效、无骨髓毒性的特点。近年来其在眼科多种疾病的治疗如抑制角膜移植排斥反应、干眼症、葡萄膜炎等方面已有广泛应用并取得较好疗效。目前，CsA眼用制剂在国内部分大医院有少量制备与应用，但均为医院制剂，未见有产品上市。由于CsA几乎不溶于水，因此常被制成油性滴眼液用于临床。但是油性滴眼剂对眼睛有较强的刺激性，患者通常不能耐受，且有过敏现象发生。乳剂作为一种优良的给药系统，目前正成为眼用制剂的研究热点。它可有效增加难溶性药物或水不溶性药物的载药量，且由于乳滴的分散度大，药物吸收快，使得眼内生物利用度高。本文将CsA制备成眼用亚微乳剂，旨在减小其眼内刺激性，提高CsA的眼内生物利用度，为临床提供安全有效的眼用免疫抑制剂。本论文主要包括以下内容：建立了CsA的HPLC测定方法，以乙腈直接溶解乳剂后测定CsA的含量，结果辅料对CsA测定无干扰，可以不经提取分离。该方法简单快捷，结果准确，重现性好，适用于CsA乳剂的质量控制。其次对CsA在水性介质和油中的溶解性能进行了考察，并测定了CsA的油／水分配系数，结果表明，CsA几乎不溶于水，但脂溶性较强。采用高速搅拌法制备初乳，再用超声法加以匀化以制备CsA眼用亚微乳剂。以稳定常数K_e、粒径及粒度分布、ζ-电位、灭菌前后pH值变化、乳剂外观等为评价指标，进行了处方及制备工艺的全面考察筛选。在此过程中，优化出了油相组成、混合乳化剂的比例及用量，确定了最佳处方。在最佳处方的基础上，考察了制备温度、pH值、乳化剂加入方式、超声功率及时间、灭菌条件等对乳剂的影响，通过控制各种工艺条件来制备质量稳定的亚微乳剂。以乳剂外观、pH值、药物含量、有关物质等为指标，进行制剂的稳定性研究。影响因素试验结果表明，CsA乳剂应在适宜温度下避光保存。加速试验及长期留样试验结果发现，CsA乳剂各项指标均未发生明显改变，质量稳定。分别采用正向透析法和反向透析法进行了CsA乳剂体外释放的研究，并考察了转速对药物释放特性的影响。结果采用反向透析法测得的药物释放速率显著高于正向透析法。且随着转速的加大，药物释放加快。采用离体兔角膜透过实验考察CsA的角膜透过行为，结果CsA眼用乳剂与油性滴眼剂相比，药物透过角膜的时滞缩短、稳态流量增加，乳剂中CsA通过角膜的表观渗透系数是油性滴眼剂的1.46倍，说明乳剂可显著增加CsA的角膜渗透性。眼刺激性试验表明，CsA眼用乳剂单次和多次给药对家兔眼无刺激作用，而CsA油性滴眼剂单次和多次给药对家兔眼均有轻度刺激作用。采用最大耐受量试验法进行急性毒性试验，结果小鼠口服给药的最大耐受量为0.3ml／10g，假设滴入眼内的CsA眼用乳剂能够全部被机体吸收，那么小鼠的耐受量倍数约为人的常用量的250倍，表明该滴眼剂用于人体具有较高的安全性。建立家兔同种异体穿透性角膜移植动物模型，将CsA眼用乳剂、地塞米松滴眼剂应用于家兔角膜移植模型中。从总的抑制角膜移植排斥反应的效应来看，CsA组、地塞米松组及联合组均能有效减轻植片混浊、植片水肿，并减少植片新生血管产生。各用药组均能显著延缓角膜植片排斥反应发生的时间，CsA组优于地塞米松组，且CsA与地塞米松联合用药具有协同作用，优于单独用药组。