高效毛细管电泳法测定食品和药物中的活性成分

来源 :山西师范大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:sgcc7186
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进入21世纪,随着人类生活水平的提高,人们对于健康和养生的关注度也逐渐提高,在确保食品安全的前提下,人们更多的希望通过食疗来调节自身的机能,在满足基本营养的同时也能祛除疾病。因此对于食品和药物中有效成分的分析研究成为当下的热点。在众多的分析检测技术中,毛细管电泳以其较高的分离效率,较短的分析时间,较低的成本消耗等优势广受分析检测实验的欢迎,是发现并解决各自研究领域中一些新问题的得力工具。本论文主要应用高效毛细管电泳-紫外吸收检测器对食品和药物中有效成分进行检测研究,具体内容如下:第一章:主要对高效毛细管电泳及其应用作出简单的综述。在技术方面包括高效毛细管电泳的发展情况,基础分离理论,分离模式,进样技术,信号检测方式及其特点等。在了解技术的基础上,本章对高效毛细管电泳技术在不同领域的应用进行简要概括,并对本论文研究的意义做出总结。第二章:应用高效毛细管区带电泳法,对3个产地沙棘果粉中的芦丁、山柰酚、异鼠李素和槲皮素4种活性物质进行同时分离测定。考察了影响电泳分离效率的各种条件:缓冲溶液20 mmol/L Na2B4O7-H3BO3,1.5 mg/m L的β-环糊精,pH 9.55,检测波长370 nm,分离电压25 kV,进样时间5 s。芦丁、山柰酚、异鼠李素和槲皮素4种活性物质在11 min内实现较好分离,线性范围分别为0.01~0.51、0.05~0.93、0.02~0.65、0.03~0.81mg/mL,相关系数r在0.9971~0.9991之间,检出限分别为5.05×10-5、2.10×10-5、3.75×10-5、1.31×10-5mg/mL(RSN=3),各物质线性关系良好。日内及日间精密度的范围是0.08%~4.72%,平均回收率在95.51%~104.66%之间,RSD%不大于3.92%(n=3)。在优化条件下,对4种活性物质标准品的混合物进行测定,并用相同的方法对3个产地沙棘果粉中活性物质的提取液进行检测。结果表明:生产地不同的沙棘中,4种被检测化合物的含量各不相同。沙棘中被测4种化合物总量最高的产自新疆乌鲁木齐,最低的产自甘肃武威,而槲皮素含量以产自山西吕梁的最高,山柰酚和异鼠李素以产自新疆乌鲁木齐最高。通过应用该方法进行检测,可以实现沙棘果粉中多种黄酮类物质的快速分离。第三章:利用高效毛细管电泳法,对苹果中根皮苷,表儿茶素,芦丁,绿原酸4种酚类化合物进行分离与测定。优化了实验条件,最佳实验条件:缓冲溶液10 mmol/L Na2B4O7-H3BO3,pH 9.2,检测波长280 nm,分离电压25 kV,进样时间5 s。其线性范围分别为0.005~0.120、0.005~0.550、0.004~0.450、0.020~0.600 mg/m L,相关系数r在0.9977~0.9992之间,最低检出限分别为3.41×10-5、5.67×10-5、3.78×10-5、3.89×10-5mg/m L(S/N=3)。之后,又进行了日内及日间精密度和平均回收率的试验,其范围分别为0.13%~4.59%和96.72%~104.55%,RSD%≤3.74%(n=3)。在优化条件下,对所检测酚类化合物标准品的混合物进行测定,并用相同的方法测定苹果皮和苹果肉样品提取液。实验结果表明,本方法操作简便、准确可靠,可作为苹果中多种酚类物质质量检测的一种手段。第四章:以高效毛细管电泳-紫外检测技术为基础,研究了决明子中5种蒽醌类化合物的毛细管电泳迁移情况,通过优化实验条件,分析各种影响因素,并对所测对照品和供试品进行定性和定量分析,最终确定最佳分离条件为:检测波长284 nm,分离电压25 kV,进样时间5 s,运行缓冲溶液Na2B4O7-H3BO3浓度20 mmol/L,pH 8.50,β-环糊精浓度为5 mmol/L,在该条件下,橙黄决明素,大黄素,大黄素甲醚,大黄酸,大黄酚在10 min内实现分离,线性范围依次为0.005~0.400、0.004~0.350、0.004~0.400、0.002~0.350、0.003~0.300 mg/mL,线性相关系数r大于0.9952,检出限分别为5.03×10-5、5.66×10-5、1.67×10-5、5.19×10-5、3.36×10-5mg/mL(S/N=3),平均回收率在96.00%~103.64%(n=3)之间,RSD%在1.39%~4.56%之间。实验结果表明,该方法线性关系良好,操作简便,分析时间短,检测成本低,可以为决明子中蒽醌类成分的分析提供一定的参考。
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