芒柄花素（Formononetin,FMN）属于天然异黄酮类化合物,是沙冬青种子总黄酮中的主要活性成分,在多种植物及传统地道药材中均有分布。初步研究表明,FMN对动物机体免疫系统具有良好的促进作用,是开发天然无毒性新型兽用免疫增强剂的—个重要方向。目前,对FMN的研究主要停留在FMN的提取与纯化,抗炎、抗氧化等作用。然而,FMN对动物机体固有免疫系统的调节作用及其机制方面的研究相对较少。因此,为深入探索FMN对动物机体固有免疫系统的作用及其分子机制,本研究采用小鼠腹腔巨噬细胞（PM）、肝脏枯否氏细胞（KCs）为研究材料,探求FMN影响细胞增殖、迁移、吞噬性、分泌细胞因子等活性作用。其次,探索TLR4/NF-κB信号通路在FMN调节小鼠PM、KCs细胞活性的信号转导作用及其分子机制。本试验分别采用细胞活性试验（体外增殖试验、细胞黏附试验、细胞迁移试验、巨噬细胞吞噬试验、细胞因子分泌试验）,以及TLR4/NF-κB关键蛋白的表达试验,探索FMN对PM、KCs细胞的免疫调节活性及其机制。研究结果表明:①FMN可以明显促进PM、KCs细胞增殖。当FMN作用剂量在2.5～10μg/mL时对PM、KCs细胞相较于空白组具有明显增殖作用,且在FMN作用剂量为2.5μg/mL时,其增殖效果最突出。②FMN对PM细胞的黏附具有促进作用。当FMN作用剂量在2.5～10μg/mL时对PM细胞黏附细胞浓度明显升高,且当FMN作用剂量为5.0μg/mL时,细胞贴壁数量最多。③FMN对PM细胞的迁移具有促进作用。当FMN在2.5～10μg/mL剂量范围内,细胞迁移率增加,且当FMN作用剂量为5.0μg/mL时,PM细胞迁移率最高,通过聚碳酸酯膜的细胞数量最多。④FMN对PM、KCs细胞的吞噬能力具有促进作用。FMN作用剂量在2.5～40μg/mL剂量范围内,均能促进PM、KCs细胞吞噬中性红染料,且吞噬量均随着FMN剂量升高而升高,当FMN作用剂量为40μg/mL时,PM、KCs细胞吞噬活性最高。⑤FMN对小鼠PM、KCs细胞因子的分泌具有程度不等的促进作用。在2.5～10μg/mL剂量范围内,FMN能促进PM细胞分泌IL-1β、IL-6,且当FMN作用剂量为5.0μg/mL时,PM细胞IL-1β和IL-6的分泌量达到了最大值。同时,FMN在2.5～40μg/mL剂量范围内均能促进KCs细胞分泌IL-1β、IL-6,且当FMN作用剂量为10μg/mL时,KCs细胞IL-1β和IL-6的分泌量达最大值。此外,当FMN作用剂量在2.5～10μg/mL范围内,均能显著促进小鼠PM、KCs细胞分泌NO。⑥FMN具有促进小鼠PM、KCs细胞TLR4/NF-κB信号通路重要蛋白的表达的作用。FMN在5～10μg/mL剂量范围内均程度不等提高PM、KCs细胞TLR4、MyD88、核因子P65表达水平。上述试验证明,FMN在—定剂量范围内能明显促进小鼠PM、KCs细胞增殖,增强PM、KCs细胞吞噬和分泌细胞因子能力,从而细胞活性被大幅度加强,机体固有免疫的功能水平明显提升。同时,也证明FMN可采用TLR4/NF-κB信号通路对小鼠PM、KCs细胞活性进行调节,发挥对机体固有免疫系统功能的调控和增强作用。此外,研究也证明,FMN对PM、KCs细胞活性的调节也具有双向调节特性,当作用剂量超出—定范围后,对PM、KCs细胞活性也具有抑制作用。