本研究以西北农林科技大学园艺学院白菜组育成的大白菜细胞质雄性不育系02A1与恢复材料02S149-5配制的可育F1、F2分离群体为材料,采用分离群体分组分析法(BSA),进行了大白菜细胞质雄性不育育性恢复基因分子标记的筛选及连锁分析。同时,对SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)技术在大白菜分子育种中的应用做了探索。主要结果如下:1.以大白菜可育分离F2群体为材料,通过花期育性分离分析,证实大白菜恢复材料02S149-5对大白菜pol细胞质雄性不育系02A1育性的恢复为一对显性基因控制。2.利用F2群体构建的可育DNA混合池和不育DNA混合池筛选了400个10碱基引物,在两DNA混合池之间有差异条带的引物用构建混合池的单株验证,发现引物S1036(AAGGCACGAG)扩增的分子量为657bp的条带为大白菜可育株特异标记,在不育单株中未扩增出。重复性好。进一步用引物S1036对F2群体进行扩增,连锁分析,S1036-657与育性恢复基因的遗传距离为8.5cM。3.回收并对特异片段S1036-657,克隆、测序。根据测得序列,在NCBI上进行BLASTn比对,发现与编码拟南芥和油菜的MYB DNA结合蛋白的核酸序列的同源性达87%。4.以大白菜基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板5种因素4个水平对大白菜SRAP反应体系进行优化,建立了适合于大白菜的SRAP-PCR优化反应体系,反应体积为25μl,Mg2+浓度为3.0mmol/L,dNTPs为0.2mmol/L,Taq酶1.5u,引物为0.2μmol/L,模板DNA73.2ng。PCR反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5循环;94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35循环,72℃延伸10min。5.利用SRAP技术对大白菜育性恢复基因进行标记分析。利用8个正向引物和11个反向引物的组合分析了可育DNA混合池和不育DNA混合池,共有12对引物在可育DNA混合池和不育DNA混合池之间扩增出多态性。最后筛选到一对引物在可育DNA混合池中扩增出特异条带,分子量大约2000bp。