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研究背景和目的:
穿支皮瓣是近年来用于修复组织缺损的一项新技术,它在传统的肌皮瓣术式基础之上,仅选择性切取供养皮瓣的穿支血管,并以该穿支血管作为血管蒂进行移植修复,保留了供区的主要血管,且无须携带肌肉组织,从而大大地减少了对供区的继发性损伤,现已广泛地应用于临床,并成为组织缺损修复技术的研究热点。然而,穿支皮瓣仅以管径细小的皮肤穿动脉为蒂取瓣,故其供皮面积偏少。如何对其进行扩大切取便成了皮瓣外科的一个重要课题。
大量研究资料显示:每一皮肤穿支均有一个明确的供血范围,并与周围其它穿支的分支相互吻合形成网状结构,即choke vessels。因此,choke vessels是连接邻近穿支血管体的桥梁,是跨区穿支皮瓣获得血供的必经之路。如何将两个以上的穿支小供区变成一个大供区,其前提是必须知道:不同穿支之间是否存在有效的吻合血管,以便能够建立起新的局部血液循环体系。因此,深入研究各穿支间的血管形态学特征,以及区间血管如何有效沟通,对指导临床上穿支皮瓣的扩大切取具有重要意义。
既往关于皮瓣微血管的研究多采用尸体血管灌注和大体解剖的方法,但由于穿支本身为微小的血管,若灌注物浓度太高、太稠,或标本不新鲜,都难以达到理想的充填效果,从而影响了对皮瓣内部更细小的血管分支的观察。本研究从静脉注射荧光标记物与组织透明两方面出发,将二者联合应用,探讨一种新的、活体状态下、用于观察皮瓣微血管构筑的方法,并在上述研究的基础之上,通过一次性整体血管造影和放射解剖学的方法,着重观察相邻穿支血管体间choke vessels的吻合类型,以明确它们之间是否具备跨区反流供血的解剖学基础,从而为临床上穿支皮瓣的扩大切取提供新的、可靠的形态学依据。
方法:
1、 ICR小鼠30只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三大组,分别通过尾静脉注射Anti-C031/FITC、FITC-UEA-I、伊文思蓝,每组动物再分为不透明组(a)和透明组(b),前者在经冰冻切片后置于荧光显微镜下观察,后者不经冰冻切片,待完全透明后直接置于镜下观察。
2、选用10具新鲜成人整尸标本,采用由唐茂林等改良的明胶-氧化铅灌注技术行一次性全身动脉造影,自外科平面(即深筋膜处)掀起体被组织,将其平铺于硬纸板上行X光拍片。调用图像处理软件Photoshop,通过层处理技术对图像进行排序、透明、配准及整合等处理,得到了躯体各个部位的完整图像。然后以不同的颜色标定每一源动脉在体被组织内的分布范围,从而得到一组类似于地图的局部皮动脉分布图。
3、SD大鼠10只,重450~600g,麻醉后行一次性全身动脉造影。沿体表腹部正中线剪开皮肤,向上延至下颌,向下至尾部剖开,在深筋膜处将皮肤与肌肉分离,将其平铺于硬纸板上拍摄X光片。应用图像处理软件Photoshop对图像进行透明、填充等处理,准确标定出每一支皮动脉所营养被覆组织的范围,并以不同的颜色填充,从而得到一张类似地图的局部皮动脉分布图。
结果:
1、未透明组Ⅰa、Ⅱa经冰冻切片处理后,镜下所见血管密度低,血管体出现明显的破坏;而经过透明处理的Ⅰb、Ⅱb在镜下可透过1000μm的厚度直接观察到清晰、完整的血管体结构;伊文思蓝染色组效果不佳。
2、通过对人体及大鼠全身造影图的观察,皮动脉分布情况可分为三型:轴型、分支型和随意型;相邻皮动脉间choke vessels的吻合情况亦可以分为三型:主干血管侧支吻合型、主干血管终末分支吻合型及主干血管向心性吻合型。
结论:
1、活体荧光染色和组织透明法联合应用实现了无需切片即可观察较厚的标本的目的,这对维持标本内血管体结构的完整性起到了重要的作用,不失为一种用于研究皮肤微血管形态学的好的方法。
2、深入研究穿支的轴向、营养范围及相邻穿支血管体间choke vessel s的血管形态学对临床穿支皮瓣的扩大切取具有一定的指导意义。