不同途径给予益生菌对雏鸡感染H9N2亚型禽流感病毒的保护作用研究

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H9N2亚型禽流感病毒(AIV)这些年一直给我国家禽养殖业带来严重危害,虽然造成的死亡率低,但是会影响禽类的产蛋产肉的性能,已经严重危害到我国禽养殖业;目前尚未发现针对该亚型的特效药,通常是依靠接种疫苗来实现对该疾病的控制,但是疫苗的接种效果也不甚理想,并且感染后继发其他疾病感染的概率也极高,此前我国对H9N2亚型AIV还没有足够的重视,所以应该提高对H9N2亚型AIV的关注,争取找到有效地防治措施,从而将损失降低。在防控这类呼吸道疾病时,抗生素的添加已经造成了耐药菌株的出现和环境污染的严重后果,微生态制剂成为更理想的选择。口服益生菌仍是最常用的微生物组调控策略,大多数关于微生物疗法抗病毒作用的研究都是基于微生物区系与肠道免疫刺激和气道免疫之间的串扰,简化口服益生菌给药。除了口服外,将有益细菌直接局部输送到呼吸道正成为一种安全且更有效的策略,但是仍然很少有研究将呼吸道微生物区系的调节作为治疗手段。因此,实验选择雏鸡为对象,在雏鸡14日龄时开始给予三种益生菌:大肠杆菌Nissle 1917(Ec N)、枯草芽孢杆菌(BSH)、鼠李糖乳杆菌(LGG)分别通过消化道和呼吸道给药的方式,也就是灌胃和滴鼻连续7天,然后感染H9N2亚型AIV,之后记录雏鸡的体重、生长状态,在攻毒后第5天和第14天取肺脏制作病理切片,取盲肠扁桃体和脾脏进行流式细胞术,结果发现口服Ec N的雏鸡对H9N2亚型AIV的抵抗效果最佳,能够使体重回涨得更快,更好地维持了肺脏组织的完整性,使雏鸡盲肠扁桃体内的CD8+T细胞水平显著上调,证明Nissle 1917从消化道进入机体后能一定程度上产生对H9N2亚型AIV的保护效果。为进一步研究了雏鸡给予Ec N后上呼吸道内菌群的变化,以此来探究其如何调节气管内菌群的分布来抵抗H9N2亚型AIV的感染。将Ec N和PBS连续给予雏鸡7天,然后感染H9N2亚型AIV病毒。在病毒感染后的第5天和第14天,取雏鸡的气管灌洗液进行16Sr RNA测序分析,经Ec N处理的雏鸡在感染H9N2亚型AIV后,其气管灌洗液较对照组相比呼吸道内的微生物拥有更多的数量和更丰富的种类,分布得也更加均匀,同为益生菌的布劳特菌属(Blautia)乳杆菌属(Lactobacillus)丰度也显著增加,在病毒感染后期,Ec N使得乳杆菌(Lactobacillus)和肠球菌属(Enterococcus)的相对丰度显著增加,说明它可以通过调整上呼吸道内微生态区系的平衡来促进雏鸡产生对H9N2亚型AIV的抵抗力。
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