论文部分内容阅读
本文以桃栽培品种‘甜桃王’、‘金童5号’、杂交后代‘1-6’(秦王×中油16)和野生种‘山桃’的茎段为外植体,进行离体快繁体系的建立,并以‘山桃’和‘1-6’的无菌苗叶片为试材,对桃叶片不定芽的再生和桃叶片的抗生素敏感性进行试验,为桃遗传转化体系的建立奠定基础。主要结果如下:(1)桃离体快繁体系的建立:以‘甜桃王’、‘金童5号’的茎段作为外植体,最适宜的消毒灭菌方法为:75%酒精30 s与0.1%HgCl2溶液10 min,茎段的污染率和萌发率分别为:33.56%和29.19%、89.48%和84.82%。最适宜‘甜桃王’、‘金童5号’、‘1-6’茎段萌发的初代培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,萌发率分别为:92.17%、90.21%、93.33%;茎段的污染率与萌发率不受品种与生理年龄的影响。‘山桃’与‘1-6’的最适继代增殖培养基和最大增殖系数存在差异;最适宜‘山桃’继代增殖的培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,最大增殖系数为5.62;最适宜‘1-6’继代增殖的培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,最大增殖系数为3.50。‘山桃’最适宜生根的培养基为MS+0.8 mg/L IBA,此时的生根率最高为25.00%,平均生根数为1.79;‘1-6’最适宜生根的培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA,生根率最高为36.67%,平均生根数为1.76。(2)桃叶片不定芽再生:对‘1-6’(栽培种)和‘山桃’(野生种)的叶片不定芽再生能力进行了比较,暗培养3周后,‘山桃’叶片所形成的愈伤组织比‘1-6’的叶片所形成的愈伤组织更大,更加致密;光培养3周以后,‘山桃’叶片的愈伤组织再生出了不定芽而‘1-6’叶片的愈伤组织没有再生出不定芽,因此‘山桃’叶片的再生能力要比‘1-6’强。云芝多糖对‘山桃’叶片愈伤组织的形成无明显的促进作用,暗培养3周以后,浓度为2 g/L时‘山桃’叶片愈伤组织形成率最高,而且此时形成的愈伤组织比较好;光培养以后,含有高浓度的云芝多糖的叶片愈伤组织褐化现象比较严重;所有处理没有再生出不定芽。硝酸银对‘1-6’叶片不定芽的再生无明显的促进作用,但是含有硝酸银的培养基中所形成的愈伤组织,在光下培养3周以后均无褐化现象,而且硝酸银浓度越大,愈伤组织的绿色越深,适宜桃叶片愈伤组织形成的硝酸银浓度为0.5 mg/L;最终没有再生出不定芽。(3)桃叶片抗生素敏感性试验:以‘甜桃王’叶片为材料,对桃叶片卡那霉素和头孢敏感性进行试验,发现卡那霉素为20 mg/L时对桃叶片的抗性筛选是比较适宜的;桃叶片共培养时添加200 mg/L头孢比较适宜。