黑果腺肋花楸多酚的提取、纯化及降血脂的研究

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随着生活水平的提高,人们的饮食结构发生很大变化。高脂肪、高蛋白、高糖和高盐的食品摄入,导致高脂血症的发病率大大增高。高脂血症是促成动脉粥样硬化、糖尿病、肾脏疾病、甲状腺功能降低等疾病的重要致病因素,然而其发病机制及病程发展十分复杂,药物作用靶点较为单一,对于发病机制复杂的代谢类疾病疗效较差,天然产物因其丰富的作用靶点逐渐受到各界关注。其中,许多多酚类化合物已被明确具有代谢类疾病的防治作用。黑果腺肋花楸浆果中含有大量的多酚类物质,目前已有诸多以其为原材料的加工产品进入市场,广阔的市场前景之下被忽略的是大量被遗弃的果渣,实现对果渣的废物利用具有较好的开发前景,且对该行业的发展具有特殊意义。故本研究以黑果腺肋花楸果渣作为原料,通过实现对其中多酚类化合物的提取与富集,以达到废渣利用的目的,同时研究其治疗高脂血症的功效。通过响应面设计以研究最优提取方法,获得黑果腺肋花楸果渣中多酚类成分的高得率。通过单因素实验研究纯化工艺,实现对其中多酚类成分的高效率富集。最后,通过动物高脂血症模型对黑果腺肋花楸多酚降血脂的效果进行评价。具体研究结论如下:(1)确定超声波辅助法提取黑果腺肋花楸果渣多酚的最佳工艺条件在单因素试验的基础上,分别选取超声功率、超声时间、液料比、溶剂浓度为影响黑果腺肋花楸果渣多酚的提取优化因素,以黑果腺肋花楸果渣多酚提取量作为试验设计的响应值,通过响应面设计软件对超声辅助提取黑果腺肋花楸果渣多酚的工艺参数进行优化,优化后的提取工艺条件为:超声功率550 W,超声时间83 min,液料比20:1 m L/g,乙醇浓度52%,黑果腺肋花楸果渣多酚提取量为61.72±0.16 mg/g。(2)确定大孔树脂的最优型号与最佳纯化条件通过静态吸附解吸试验从4种常见型号的大孔树脂材料中选择性能最佳的一种进行纯化方法学试验。同样通过静态吸附试验与静态解吸试验,确定最佳上样液质量浓度,吸附平衡时间,解吸平衡时间,上样液的p H值,洗脱剂的浓度。动态吸附试验与动态解吸试验,确定上样液的吸附流速,洗脱剂的解吸流速。试验结果表明DM-130型号大孔树脂的吸附、解吸能力较好,优化后的纯化条件为上样液质量浓度4.56 mg/m L,吸附平衡时间4h,解吸平衡时间2h,上样液的p H值4,洗脱剂乙醇的浓度为80%,上样液的吸附流速为2 BV/h,洗脱剂的解吸流速为2 BV/h,在此条件下多酚的纯度可由粗提物的12.52%提高到71.36%。(3)通过动物实验评价黑果腺肋花楸多酚降血脂的效果将60只雄性KM小鼠,分为正常对照组、高脂模型组、阳性给药组、黑果腺肋花楸多酚低剂量组、黑果腺肋花楸多酚中剂量组、黑果腺肋花楸多酚高剂量组,每组各10只,其中正常组小鼠进食普通饲料,其余5组小鼠均进食高脂饲料,阳性给药组给药阿托伐他汀。通过对比各组小鼠血清学指标发现,高脂组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)参数指标均显著上升,而高密度脂蛋白(HDL-C)的参数指标均显著下降。高脂组小鼠与正常模型组小鼠相比,无论从体重增长率、食物利用率以及肝指数均显著升高,结果表明高脂组小鼠已患有高血脂症,造模成功。同食高脂饲料的黑果腺肋花楸多酚低、中、高剂量组,灌胃不同剂量多酚后小鼠血清中TC、TG、LDL-C参数指标均有不同程度的降低,而HDL-C参数指标显著升高,肝脏组织中的门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)降低,同时显著降低了小鼠的体重与肝指数,表明黑果腺肋花楸多酚对患有高血脂症的小鼠具有降血脂的功效。
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