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背景:多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是以中枢神经系统白质炎症性脱髓鞘病变为主要特点的自身免疫病,按照髓鞘脱失的机制分为四种病理亚型:Ⅰ型为巨噬细胞介导性髓鞘脱失,Ⅱ型为抗体介导性髓鞘脱失,Ⅲ型为少突胶质细胞远端病变性髓鞘脱失,Ⅳ型为原发性少突胶质细胞胞体损伤性髓鞘脱失。近年来更多的研究者通过建立cuprizone诱导的脱髓鞘模型模仿Ⅲ型多发性硬化。Cuprizone模型可通过饮食方便的调控损伤进程,具有很好的重现性、可控性和一致性,因此被广泛应用于脱髓鞘研究中。Cuprizone诱导的脱髓鞘模型可分为急性和慢性两种模型,其中急性模型可发生髓鞘再生而慢性模型髓鞘不可再生,因此该模型即可以用来研究髓鞘脱失又可以研究髓鞘再生的机制。小胶质细胞是中枢神经系统内重要的免疫细胞,在cuprizone模型病灶区域积聚、活化、释放炎性因子参与髓鞘脱失过程,同时也具有清除髓鞘残骸、促进髓鞘再生的作用。这种“双刃剑”作用与小胶质细胞的极化状态有关。小胶质细胞在中枢神经系统内存在两种极化形式,即经典激活M1型和代替激活M2型。M1型小胶质细胞通过分泌促炎细胞因子加重中枢神经系统炎症,M2型小胶质细胞则通过分泌抑炎细胞因子以及神经营养因子促进损伤修复。然而cuprizone诱导的急、慢性脱髓鞘模型中小胶质细胞的极化状态及其与髓鞘再生的关系不清。目的:探讨小胶质细胞在cuprizone诱导的急、慢性脱髓鞘模型中的极化情况以其与髓鞘再生的关系。方法:应用0.2%cuprizone饲育C57BL/6小鼠6周和16周建立中枢神经系统脱髓鞘急、慢性模型,cuprizone饲育6周后恢复正常饮食1周、2周建立恢复期模型。利用免疫组织化学方法检测小胶质细胞(Iba-1)活化情况、少突胶质细胞(CC1)数目以及髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达。利用实时定量PCR(Real time PCR)检测脑组织内细胞因子(IL-1ip、TNF-a)mRNA以及M1型小胶质细胞标记物(IL-1β、TNF-a、CD86、CD32、CD16),M2型小胶质细胞标记物(Arg-1、mrc-1、Chil-3、Tgfb-1)mRNA 的表达。应用 Image J 以及细胞计数的方法对实验数据进行收集,采用单因素方差分析对实验数据进行统计分析。当户<0.05时有统计学差异。结果:1.Cuprizone诱导的急、慢性脱髓鞘模型小鼠胼胝体和皮层均可见严重的髓鞘脱失,MBP的表达以及CC1阳性细胞数目均明显减少,急性模型恢复期MBP免疫组织化学染色显示髓鞘残留量增多,CC1阳性细胞数目明显增多,发生明显的髓鞘再生。2.Cuprizone诱导的急性脱髓鞘模型小鼠胼胝体和皮层小胶质细胞数量明显增多且活化明显,恢复期小胶质细胞的活化程度较急性期减轻,细胞数目减少,慢性期小鼠脑内小胶质细胞活化程度较急性期显著减轻且数目明显减少。3.Cuprizone诱导的急性脱髓鞘模型小胶质细胞分泌的促炎细胞因子IL-1(3、TNF-a mRNA的表达明显上调,恢复期小鼠脑内IL-1β、TNF-α mRNA的表达逐步下调,慢性期小鼠脑内细胞因子IL-1β、TNF-α mRNA的表达与对照组相比未见明显差异。4.M1和M2型小胶质细胞标记物mRNA在cuprizone诱导的急性脱髓鞘模型中表达上调,恢复期M1和M2型小胶质细胞标记物mRNA的表达较急性期明显下调,慢性期M1、M2标志物mRNA的表达与对照组相比均未见明显差异。结论:1.Cuprizone诱导的急性脱髓鞘模型小胶质细胞处于明显活化状态,存在M1和M2两个方向极化。2.慢性模型小胶质细胞形态虽有活化,但是无明显极化。小胶质细胞功能瘫痪可能是导致慢性模型髓鞘再生不能的原因之一。