卵母细胞体外成熟(IVM)是决定体外胚胎发育的关键过程。体外高氧培养环境造成的氧化应激是影响卵母细胞体外成熟质量的重要因素。活性氧的增加会使脂质、蛋白质、DNA受到损伤,最终可能导致卵母细胞质量和后续胚胎发育能力降低。本实验探究了抗氧化剂三(2-羧基乙基)膦盐酸盐(TCEP-HCL)对猪卵母细胞体外成熟和受精胚胎体外发育能力的影响。我们在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加了三个浓度TCEP-HCL(50,100和200μM)进行处理。结果发现与未添加组相比,100μM TCEP-HCL处理显著增加了卵母细胞第一极体排出率(P<0.05)、受精卵分裂率(P<0.05)、囊胚形成率(P<0.05)、囊胚总细胞数(P<0.05);200μM TCEP-HCL对卵母细胞的成熟以及后续胚胎的发育没有影响(P>0.05)。TCEP-HCL处理影响了卵母细胞的受精情况,和未处理组相比,100μM TCEP-HCL处理显著降低了猪卵母细胞的多精入卵率(P<0.05),并显著提高了单精入卵率(P<0.05)。为了探究TCEP-HCL对猪卵母细胞体外受精和胚胎发育能力改善的潜在机制,我们检测了MⅡ期卵母细胞和体外受精囊胚中的抗氧化和细胞凋亡相关指标。结果发现,TCEP-HCL处理显著降低了卵母细胞内活性氧(ROS)水平(P<0.05),100μM TCEP-HCL处理提高了卵母细胞内氧化应激相关基因SOD2的表达。同时,和其他实验组相比,100μM TCEP-HCL处理显著增加了卵母细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量(P<0.05);显著提高了卵母细胞中线粒体的含量(P<0.05);显著降低了IVM后卵母细胞凋亡率(P<0.05),显著增加细胞凋亡抑制基因BCL2的表达(P<0.05)。TCEP-HCL处理降低了囊胚细胞凋亡,特别是在100μM和200μM TCEP-HCL处理组中表现最为明显(P<0.05)。以上研究结果表明,适宜的TCEP-HCL处理降低了猪卵母细胞体外成熟过程中的氧化应激水平,提高了体外受精胚胎的质量和发育能力。