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目的研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞Beclin1、哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)、微管相关蛋白轻链3(LC3)水平,初步探讨MDS患者骨髓原代细胞自噬水平的改变。材料与方法38例MDS患者为实验组(MDS组),26例非恶性贫血患者为对照组。骨髓细胞铁染色检测骨髓细胞内、外铁含量和环形铁粒幼细胞;流式细胞仪检测骨髓单个核细胞活性氧(ROS)水平;透射电镜观察骨髓单个核细胞内自噬泡数量;丹(磺)酰戊二胺(MDC)法检测骨髓单个核细胞自噬泡水平;免疫荧光法观察观察骨髓单个核细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白表达,qPCR法检测自噬相关基因Beclin1、LC3、mTOR mRNA表达,Western blottiing检测Beclin1、LC3蛋白的表达。结果(1)骨髓细胞铁染色发现MDS患者细胞外铁、细胞内铁和环形铁粒幼细胞数量均较对照组增加。(2)流式细胞术检测到MDS组(n=7)患者骨髓单个核细胞ROS水平(1352.41±667.51)高于对照组ROS水平(n=5,596.46±233.99,P<0.05)。(3)透射电镜观察到MDS患者骨髓细胞内存在双层膜结构自噬泡,内含溶酶体。(4)MDC染色发现MDS组(n=4)染色阳性(自噬泡)细胞数目比例(9.75%±2.63%)显著高于对照组(n=5,2.90%±0.89%,P<0.05)。(5)免疫荧光法观察到MDS组(n=4)LC3阳性细胞数目比例(6.13%±1.03%)显著高于对照组(n=4,1.5%±0.58%,P<0.05)。(6)qPCR法检测到低危/中危-1 MDS组(n=14)骨髓单个核细胞Beclin1mRNA表达水平(3.61±3.02)显著高于对照组(n=11,1.55±1.03,P<0.05);中危-2/高危MDS组(n=8)Beclin1 mRNA表达水平为2.63±2.79,高于对照组,但没有统计学差异,P>0.05;低危/中危-1MDS组(n=10)骨髓单个核细胞LC3A mRNA水平(6.56±3.97)显著高于对照组(n=7,1.21±0.95,P<0.05);低危/中危-1MDS组(n=9)骨髓单个核细胞的自噬负性调控基因mTOR mRNA水平(0.39±0.37)显著低于于对照组(n=9,1.50±1.03,P<0.05);中危-2/高危MDS组(n=4)mTOR mRNA表达水平为1.73±1.69,高于对照组,但没有统计学差异,P>0.05。(7)Western blotting发现Beclin1、LC3蛋白表达MDS组高于对照组。结论MDS患者ROS水平升高,低危/中危-1MDS组患者较对照组骨髓单个核细胞自噬水平升高,中危-2/高危MDS组患者较对照组骨髓单个核自噬水平无明显改变,提示自噬对MDS患者细胞可能起保护性作用,自噬水平相对不足可能与患者高危险性向AML转化相关。