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目的:测定地塞米松处理人肝癌细胞Huh-7对基Pin1mRNA水平及蛋白表达的影响,构建Pin1启动子的荧光素酶报告基因载体,观察地塞米松对Pin1转录活性的调节作用。方法：1、应用RT-PCR法及Western-blot(?)定地塞米松处理Huh-7细胞后在0h、3h、6h、12h、24h的mRNA水平及蛋白表达情况；2、从野生型小鼠中提取基因组DNA,PCR法扩增Pin1基因启动子序列,纯化鉴定后与pGL4.0公别双酶切,再通过T4连接酶连接,获得Pin1启动子的荧光素酶报告质料pPin1-Luc;3、用Effectene转染试剂将Pin1启动子的荧光素酶报告质粒nPin1-Luc和不含Pin1启动子的pGL4.0质粒分别转染Huh-7细胞,以地塞米松处理为刺激组,地塞米松未处理为加干预组,72h后进行双荧光素酶报告基因检测。结果:1、地塞米松处理人肝癌细胞Huh-7细胞后,Pin1的mRNA水平在3h时最高,且有统计学意义(P<0.01),蛋白水平在6h时表达最高,也有统计学意义(P<0.01);2、野生型小鼠中获得Pin1基因启动子序列,与pGL4.0载体由XhoI、HindⅢ酶切后经T4连接酶连接,获得重组的荧光素酶报告质粒pPin1-L uc,经酶切及DNA测序鉴定完全正确;3、构建的重组质粒pPin1-L uc与阴性对照质粒pGL4.0分别转染Huh-7细胞,双荧光素酶报告基因技术检测重组质粒在所转染细胞中启动荧光素酶表达的启动子活性,结果发现Dex处理组的重组质粒Huh-7细胞中启动荧光素酶表达的相对荧光素酶强度较Dex未处理组有明显升高,约为后者的2倍(P<0.05)。结论:在地塞米松刺激作用下Pin1在人肝癌细胞Huh-7中mRNA及蛋白的水平均增强且有统计学意义(P<0.01),成功构建Pin1启动子的荧光素酶报告质粒pPin1-L uc,发现地塞米松可增强Pin1基因启动子的转录活性。