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目的: 1.构建以透明质酸为淋巴系统特异结合靶头的阳性大分子造影剂透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ),对其相关理化性质进行表征,考察其生物安全性以便应用于磁共振造影研究; 2.探索透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)化合物更优制备及尺寸控制方案以达到该化合物可控微观尺寸及更高弛豫效能; 3.以马根维显为对照,评估该化合物应用于磁共振间质淋巴造影的可行性;初步探索其应用于良恶性淋巴结病变鉴别诊断中的价值; 方法: 1.制备:对透明质酸及-二乙三胺五乙酸羧基进行乙二胺酰胺化桥接,螯合钆离子形成目标分子结构;理化性质表征:测定目标化合物分子结构、尺寸大小、螯合钆离子含量及体外磁共振信号;生物安全性测试:采用MTT法考察不同浓度梯度及不同孵育时间条件下目标化合物对Hela细胞生存率的影响;将不同剂量化合物溶液注射至9组小白鼠体内,连续观察2周,以计算小鼠的半数致死量。 2.采取分步骤调节PH值及改变反应溶剂相以优化反应物合成条件;采用不同分子量透明质酸钠为反应原料,以达到目标产物微观尺寸可控; 3.(1)磁共振间质淋巴造影的可行性研究:采用马根维显为对照,对透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)对新西兰兔正常淋巴系统间质MR淋巴造影效果进行评价;(2)透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)应用于良恶性淋巴结病变鉴别诊断中的价值:建立新西兰兔反应性炎症淋巴结及肿瘤转移淋巴结模型,采用透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)对淋巴结病变行MR淋巴造影,考察应用其诊断及鉴别诊断良恶性淋巴结病变的可行性。 结果: 1.目标化合物透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)成功制备,红外吸收光谱法表明其结构与预期一致;化合物平均水合粒径为350nm,螫合钆离子浓度为0.02±0.005mol/L;钆离子浓度相同时,透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)水溶液TIWI信号强度高于马根维显水溶液;细胞毒性试验及小鼠急性毒性试验显示其良好的生物安全性。 2.通过分步骤调节PH值及改变反应溶剂相的方法可达到反应产物的优化,体现在钆离子螯合率的提升,经过测定螯合钆离子浓度为0.05±0.005mol/L,较原制备方法提高1倍;随着原料透明质酸钠分子量的增加,产物微观尺寸具有上升趋势。控制原料分子量的方法可以在一定范围内达到产物分子尺寸可控。 3.间质注射透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)溶液MR图像可见下肢胭窝淋巴结及引流淋巴管显像,间质注射马根维显可观察到静脉显像。钆离子浓度远低于马根维显的透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)可达到更大的强化峰值,峰值信噪更高,与马根维显组具有显著差异。透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)时间-信号强度曲线下降过程缓慢表现为一个较长的强化平台期。 炎症反应性及转移性淋巴结在T2WI平扫表现为均匀高信号,采用透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)进行间质造影时炎症反应性淋巴结表现为均匀强化。肿瘤转移淋巴结在间质造影时可见淋巴结非均匀强化,产生信号缺损,在图像上可表现为如絮状或变片状强化、充盈缺损形强化或不强化。通过ROI法绘制时间-信号强度曲线得到,炎性增生性淋巴结强化更快,强化峰值高,平均信噪比均高于同时间测定的肿瘤转移淋巴结,具有统计学意义。肿瘤淋巴结造影呈低灌注状态。 结论: 1.我们制备了目标大分子透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)。通过对其相关性质的表征,我们发现此化合物具有较高生物安全性、较高的弛豫率、较为稳定的分子粒径分布等优势特性,具有应用于磁共振造影的潜力。 2.通过性能改进探索,我们可提高目标化合物中螯合钆离子浓度并在一定范围内可达到其尺寸可控。 3.应用透明质酸-二乙三胺五乙酸-钆(Ⅲ)用于间质淋巴造影是可行的,采用其鉴别炎症反应性及肿瘤转移淋巴结可能够提高诊断的灵敏度及特异性。