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骨桥蛋白(OPN)是一种含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)的分泌型糖基化磷蛋白,归类于细胞外基质蛋白。有研究表明OPN在分泌期子宫内膜上皮细胞、侵袭的滋养细胞、蜕膜腺上皮、胎盘上都有表达。且OPN在哺乳动物的母-胚界面持续表达,人们推测OPN是影响子宫-胚胎微环境的重要因素。因此,应用现代分子生物学技术研究猪OPN基因的分子遗传结构和时空表达,对研究猪的繁殖性状的候选基因具有十分重要的理论意义。本研究以大白猪、野猪和野家杂种猪为研究对象,克隆了大白猪和野猪的OPN基因,对其结构功能及分子进化进行了分析,并对大白猪和野家杂种猪的OPN基因在心脏、肝脏、胃、脾脏、肾脏、肺脏、大肠、小肠、肌肉、子宫和卵巢的表达情况进行了比较分析。主要研究结果如下:通过克隆测序的方法克隆了大白猪和野猪OPN基因的全长cDNA序列,通过序列比对发现,野猪的变异位点较大白猪群体内的变异位点丰富。通过对OPN基因的结构功能域的分析发现,发现OPN蛋白仅有一个OPN特征性功能域,功能相对单一,对其进行系统发育分析表明猪与牛、水牛、羊有较高的同源性,而鸡的变异程度稍大,处于进化树的末端。半定量RT-PCR检测结果表明,大白猪OPN基因在不同生长发育阶段的心脏、肝脏、胃、脾脏、肾脏、肺脏、大肠、小肠、肌肉、子宫和卵巢共11个组织中均有表达,但不具有明显规律性,而在性腺组织中的表达表明OPN表达随着日龄的增加,逐步增高,270日龄达到高峰,以后有所下降。OPN基因在不同日龄的大白猪和野家杂种猪的不同组织的表达情况不同。而OPN基因在大白猪和野家杂种猪性腺组织表达来看都存在一个先高后低,以后达到高峰,大白猪出现在270日龄,而野家杂种猪出现在360日龄。采用Western blot技术检测了大白猪不同组织的骨桥蛋白表达情况,结果表明不同组织表达情况不同,心脏、肺脏、子宫表达70kDa和45kDa的蛋白,胃、肾脏、小肠表达70kDa、45kDa和25kDa的蛋白而肝脏和肌肉只表达70kDa的蛋白。利用诱导表达和RT-PCR相结合的方法,检测了在子宫内膜上皮细胞里添加不同的激素对OPN表达的影响,结果发现孕激素正调控OPN基因的表达而雌激素负调控OPN基因的表达。