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本论文包括大黄指纹图谱建立并结合化学计量学分析用于多种大黄的鉴别及质量评价研究、大黄药材色谱峰成分鉴定及对照品纯度测定、大黄对照提取物制备、大黄药材、制剂、提取物多指标含量测定方法的方法学验证及大黄对照提取物标化、大黄替代对照品法的建立及应用五个部分。本论文第一部分为大黄指纹图谱建立并结合化学计量学分析用于多种大黄的鉴别及质量评价研究。通过收集的6种31批正品及非正品大黄样品，建立大黄药材及饮片的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。直观比较254nm及430nm波长下各品种大黄药材及饮片色谱图的异同，并利用CHROMAP软件进行相似度、聚类和主成分分析。指纹图谱经化学计量学分析，可区分正品大黄与非正品大黄，说明建立的大黄指纹图谱和化学计量学分析方法可有效区分正品大黄和非正品大黄，这为全面评价正品大黄的质量、相关标准的修订提供有益的参考。本论文第二部分为大黄药材色谱峰成分鉴定及对照品纯度测定。使用液质联用(HPLC-MS)技术对色谱峰进行成分识别，而后购买相应的对照品对识别结果进行验证，得到准确的大黄色谱峰成分鉴定结果。将对照品做核磁实验定性，并用高效液相色谱法对其进行纯度测定，为下一步建立含量测定方法做准备。本论文第三部分为大黄对照提取物制备。采用大孔吸附树脂的方法纯化得到含结合蒽醌及苯丁酮类成分的提取物，采用酸解的方法得到游离蒽醌混合物，将提取物和游离蒽醌混合得到最终的大黄对照提取物。本论文第四部分为大黄药材、制剂、大黄提取物多指标含量测定方法的方法学验证及大黄对照提取物标化。对建立的含量测定方法进行方法学验证，分别验证该法在大黄药材、含大黄制剂及大黄提取物中应用的可行性；对第三部分得到的大黄对照提取物进行标化。本论文第五部分为大黄替代对照品法的建立及应用。利用第三部分得到的大黄对照提取物，建立大黄对照提取物含量测定法，验证方法的耐用性，而后将建立的方法应用到收集的五批药材中，与外标法测定结果比较无显著性差异，证明方法切实可行；另建立大黄双标多测法—以芦荟大黄素为定量参照成分，通过其它八个成分与芦荟大黄素的相对校正因子计算得到含量值，定性部分则以大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、芦荟大黄素为参照成分预测其它成分的保留时间。考察了双标多测法的耐用性并将此方法应用到收集的五批药材中，与外标法测定结果比较无显著性差异。