半夏多糖对希罗达干预下小鼠腺癌MHC-Ⅱ分子表达的增效作用

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目的以小鼠移植性结肠腺癌CT-26动物模型为对象,比较生理盐水、半夏多糖、希罗达,半夏多糖联合希罗达对小鼠CT-26皮下移植瘤的抑制作用,流式细胞术检测不同组别荷瘤小鼠外周血CD4、CD8的变化以及不同组别瘤组织细胞表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达情况,以更好地为临床提供客观而科学的依据。方法1.改良水提醇沉法提取半夏多糖。2.BALB/C小鼠32只,CT-26结肠腺癌细胞腋下种植造模成功后,随机分为:生理盐水组、半夏多糖低剂量组、半夏多糖中剂量组和半夏多糖高剂量组,每组8只,分别给予不同的干预:生理盐水组给予生理盐水0.2ml每天灌胃,6次/周;多糖低剂量组给予半夏多糖0.2ml灌胃,剂量每天为100mg/kg,6次/周;多糖中剂量组给予半夏多糖0.2ml灌胃,剂量每天为200mg/kg,6次/周;多糖高剂量组给予半夏多糖0.2ml灌胃,剂量为每天400mg/kg,6次/周。2周实验结束时收集各组瘤块称重,通过计算抑瘤率,观察不同剂量组半夏多糖的量效关系,得出半夏多糖的最佳灌胃剂量。3. BALB/C小鼠24只,CT-26结肠腺癌细胞腋下种植造模成功后,随机分为:生理盐水组、半夏多糖组、化疗组、半夏多糖联合化疗组,分别给予不同的干预:生理盐水组给予生理盐水0.2ml每天灌胃,6次/周;半夏多糖组予以半夏多糖200mg/kg/日灌胃,6次/周;化疗组给予希罗达灌胃,每日267mg/kg,6次/周;半夏多糖联合化疗组给予半夏多糖200mg/kg+希罗达267mg/kg灌胃。2周实验结束时收集各组小鼠外周静脉血,手术摘取瘤体计算抑瘤率。4.流式细胞仪检测外周血CD4、CD8变化以及瘤组织细胞MHC-Ⅰ及MHC-Ⅱ的表达情况。结果1.应用改良水提醇沉法可以较为彻底的提取出相对纯净的半夏多糖,半夏多糖得率1.92%,半夏多糖纯度可达91%以上。2.成功建立小鼠移植性结肠腺癌CT-26动物模型。3.实验发现随着半夏多糖给药剂量的增加,抑瘤率也随之变化,呈一定的量效关系,确定半夏多糖200mg/kg为最佳剂量。4.联合用药组抑瘤率高于希罗达单药组,存在统计学差异(P<0.05)。5.流式细胞仪检测用药组CD4+%与明显高于生理盐水组CD4+%,有统计学差异P<0.05,用药组间无明显统计学差异P<0.05。用药组CD4+/CD8+明显高于生理盐水组,有统计学差异P<0.05;用药组间(CD4+/CD8+)半夏多糖联合希罗达组高于希罗达组,有统计学差异P<0.05。6.用药组和生理盐水组MHCⅠ均有较高表达;而在MHCⅡ类分子表达上,半夏多糖联合希罗达和半夏多糖组、希罗达组、生理盐水组存在明显差异(P<0.01)。结论1.半夏多糖联合希罗达可提高模型动物外周血CD4+/CD8+的比值。2.半夏多糖联合希罗达可促使模型动物MHC-Ⅱ分子的表达。以上提示半夏多糖可促进希罗达的抑瘤作用,其机理可能与半夏多糖提高小鼠腺癌MHC-Ⅱ分子的表达、增强荷瘤小鼠细胞免疫的作用有关。
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