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本文以南瓜为原料,分离纯化出两种具有不同结构特征的酸性多糖,分别为水提南瓜酸性多糖WAP和碱提南瓜渣酸性多糖AAP,并对WAP和AAP的结构进行了解析。对WAP进行了硫酸化修饰,以肝素为参照物研究了硫酸化南瓜多糖SWAP与阿尔兹海默症关键蛋白tau的相互作用方式和作用位点。研究了 SWAP与抗凝血相关蛋白抗凝血酶III和肝素辅助因子II的相互作用,探索其抗凝血活性和作用途径。研究了碱提酸性多糖AAP与半乳凝集素-3的相互作用,并在细胞水平对其半乳凝集素-3抑制活性进行了验证。(1)南瓜冻干粉经热水浸提,80%乙醇沉淀,得到水提粗多糖WP,粗多糖WP经离子交换层析和乙醇二次沉淀得到主要酸性组分WAP,分子量为8.32×104Da。单糖组成分析得出WAP以半乳糖醛酸为主,酯化度高,为67.91%。通过核磁共振对WAP的结构进行了鉴定,确定WAP为α-(1-4)-糖苷键连接的聚半乳糖醛酸,原子力显微镜测得WAP在水溶液中呈链状分布,少分支,平均链长为160.8 nm,链高为0.28～1.4nm。(2)不溶性南瓜残渣冻干粉经碱液浸提,80%乙醇沉淀,得到碱提粗多糖AP,粗多糖AP经离子交换层析和乙醇二次沉淀得到主要酸性组分AAP,分子量为2.26×104 Da。单糖组成分析得出AAP为杂多糖,单糖组成为鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖(7.4:25:28:2.6),酯化度低,仅为5.4%。通过核磁共振对AAP的结构进行鉴定,确定AAP主链为以α-(1-4)-糖苷键连接的半乳糖醛酸和以[→4)-α-D-半乳糖醛酸-(1→2)-α-L-鼠李糖-(1→]方式交替连接的半乳糖醛酸和鼠李糖构成;侧链为β-(1-4)-糖苷键连接的聚半乳糖和少量的阿拉伯糖。(3)对南瓜多糖WAP进行硫酸化修饰,得到硫酸化南瓜多糖SWAP,硫酸根含量为16.7%,取代度1.81,分子量为2.47×104Da。经核磁共振鉴定,推测WAP的硫酸化修饰主要发生在半乳糖醛酸的C-2和C-3位。利用表面等离子共振测得硫酸化南瓜多糖SWAP与tau K18的结合强度Ki=1.15×10-8M,高于肝素(KD=2.03×10-7M)。核磁共振实验发现SWAP与tauK18主要的结合位点与肝素基本吻合,为tau K18的R2结构域,表明SWAP能够很好地仿效肝素与tau K18蛋白结合,体现了 SWAP潜在的抑制tau蛋白转移的活性。(4)利用表面等离子共振技术研究了硫酸化南瓜多糖SWAP与抗凝血酶III和肝素辅助因子II的相互作用,SWAP与抗凝血酶III结合强度Ki=1.71×10-4M,低于肝素,为弱相互作用;与肝素辅助因子II的结合强度Ki=1.39×10-7M,与肝素接近,为强相互作用;表明SWAP主要通过肝素辅助因子II介导发挥对凝血酶的抑制作用。SWAP能够明显地延长活化部分凝血酶时间和凝血酶原时间,对凝血酶时间没有显著的影响,表明SWAP主要通过内源性途径发挥抗凝血作用。碱提酸性多糖AAP能够与半乳凝集素-3结合,结合强度KD为1.26×10-6 M,AAP能在细胞水平作为Gal-3抑制剂阻抑红细胞凝集。