新型高分子化合物介导下精子携带法转基因斑马鱼的初步研究

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我们在精子与外源DNA孵育时,使用了一种新型医用高分子化合物dendrimer G<,4>N<,4>作为DNA向精子导入的载体,探讨其对转基因阳性率的影响.精子在体外孵过程中可捕获外源DNA.在高分子介导下,通过原位杂交检测到61.4﹪斑马鱼精子捕获环状质粒pWay5 NDA;未加高分子的实验线中,精子捕获DNA效率仅为39.3﹪.用捕获pCH110质粒DNA的精子进行人工受精,在孵化24-72小时的胚胎或者仔鱼中,通过组织化学显色检测质粒上的LacZ基因表达率.结果显示高分子介导下的阳性转基因斑马鱼为23.3﹪;而未加高分子的实验组中,转基因阳性斑马鱼为10﹪.此外,我们还对高分子化合的安全性进行了检测,初步证明它对精子无毒性,不影响受精和胚胎发育.该文对转基因实验用鱼、高分子化合物的安全性、高分子介导下精子捕获外源DNA效率和转基因效率、高分子应用前景等进行了讨论.
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