cGAS-STING通路不仅能够介导免疫防御,抵抗多种外来病原体的感染,而且可以识别肿瘤来源的DNA,引发机体的免疫反应。但是,cGAS通路的异常激活也会导致自身免疫性疾病。因此,对cGAS-STING通路进行调控有很高的疾病治疗价值。为了寻找合适的调控剂,我们试图从两种不同来源的化合物入手进行探索。一是化学合成的方法,通过合成肽核酸型的cGAMP类似物,建立筛选体系,进行生物活性检测,评估其作为cGAMP拮抗剂的能力,二是从众多天然来源的化合物中筛选,我们首先选择棘胸蛙粉（内含大量抗菌肽,具有广谱抗菌、抗病毒和抗肿瘤活性）作为研究对象,利用已有的筛选体系探索其对cGAS-STING通路的调控作用,建立结构活性关系,寻找有效的免疫活性调控化合物。cGAMP作为cGAS-STING通路的第二信使,能够通过调节级联系统中酶的活性,从而控制体系的免疫反应。因此,cGAMP及其拮抗剂的合成研究具有很高的研究价值。本文在查阅相关文献的基础上,设计并合成了一类在结构上同cGAMP高度相似的肽核酸类似物c PNA。由于c PNA本身不带电荷,能够抵御核酸酶和蛋白酶的降解,具有很好的生物稳定性。故推测其可能具有同cGAMP相似的生物功能,从而能与cGAMP竞争下游的蛋白受体,发挥相应的调控作用。为了验证推测,我们将通过化学方法合成的6个cGAMP类似物,在THP1-Lucia-IFNβ-ISG细胞系上进行了初步筛选。成功筛选得到两种对于天然免疫通路具有一定调节作用的c PNA-U和c PNA-A。c PNA-U对于天然免疫中的DNA通路有一定的抑制作用,而c PNA-A则对RNA通路有一定的促进作用。接下来准备在m RNA水平对它们的作用效果展开验证。蛙类是生物活性肽的重要储备库,其皮肤分泌物中含多种抗菌肽。抗菌肽具有一定的抗肿瘤功能,如:对免疫细胞具有趋化作用,能够增强抗原呈递细胞对肿瘤抗原的摄取和呈递能力,诱导IL12和IFNγ等免疫因子的分泌,促进机体免疫反应。我们选择含有大量生物活性肽的棘胸蛙粉作为研究对象,进行提取工艺的优化和对先天免疫通路影响的探究。利用之前建立的THP1-Lucia-ISG细胞筛选系统分别对经超声-微波协同萃取得到的蛙粉原液浓缩物以及蛙粉原液进行活性测试。结果表明蛙粉原液能够增强ds DNA诱导的IFNβ表达,提高细胞免疫能力。相比于浓缩产物,采用蛙粉原液处理具有更好的增强效果,且IFNβ表达水平与药物浓度之间存在更好的相关性。通过对比不同提取方式所得蛙粉原液的作用效果,发现用纯水提取所得原液具有最好的增强IFNβ表达效果。故在随后对蛙粉原液最佳浓度的探究中,选择不同提取时间的水提原液（WF-1）作为研究对象。结果发现,提取时间为45 min的蛙粉原液（WF-1-45 min）,在加入浓度为4 A/m L时对ds DNA诱导的IFNβ表达具有最好的增强效果,最高可以达到对照组的2.4倍。最后,经过三年的研究生学习,取得了以下成果:（1）成功利用有机合成手段制备了6个肽核酸单体,6个肽核酸型cGAMP类似物,并借助THP1-Lucia-IFNβ-ISG筛选体系检测其生物活性。其中,c PNA-U对于DNA通路有一定的抑制作用,而c PNA-A则对RNA通路有一定的促进作用。（2）完成了棘胸蛙粉提取工艺优化,确认了蛙粉原液能够增强ds DNA诱导的IFNβ表达。明确了采用纯水作为提取溶剂,提取时间为45 min的蛙粉原液（WF-1-45 min）对ds DNA诱导的IFNβ表达具有最好的增强效果,最高可以达到对照组的2.4倍。