论文部分内容阅读
目的用体视学方法定量揭示胃上皮性肿瘤细胞核和腺上皮的三维形态结构的特点及变化规律,探讨有关体视学参数在胃的良恶性上皮性肿瘤诊断方面的意义,为病理诊断及预后的定量分析奠定基础。方法收集82例外科手术切除胃腺癌、胃腺瘤及正常胃粘膜上皮,病例包括:胃腺癌55例,其中高分化15例、中分化20例、低分化20例,胃腺瘤8例,胃腺癌患者癌旁正常胃粘膜19例。石蜡切片,HE染色。每张切片在安装了数码摄像机的光学显微镜40倍物镜下随机获取图像,经TK-C1481BEC显微摄像系统输入计算机。每例随机取10个视野,用Image-Pro图像分析软件系统进行测试。测试前,首先用物镜测微尺对该软件进行标定,然后用鼠标勾描每幅图像中的细胞核和腺体,分别测试它们的面积及周长并计数腺体周长上的细胞数。选用的体视学参数有:细胞核的体积密度Vvn,epi、表面积密度Svn,epi、表面积与体积比Rsvn、平均自由程λepi、平均体积Vn, epi、平均表面积Svn, epi、核的数密度Nvn,epi、核浆比Rnp和腺上皮细胞的线参照数密度NLS,细胞核的Vvn.epi、Svn.epi、Rsvn、λepi、Vn, epi、Sn,epi、Nvn,epi、Rnp以细胞为参照空间,NLS的测试以腺体外表面为参照系。对以上各组测试所得的体视学参数值行单因素方差分析和组间两两比较;对胃癌、胃腺瘤和正常胃粘膜上皮进行判别分析和逐步判别分析,对不同分化程度的胃腺癌和正常胃粘膜上皮进行判别分析和逐步判别分析,对胃腺瘤和正常胃粘膜上皮进行判别分析和逐步判别分析。结果一、胃上皮性肿瘤的体视学测试结果Vvn,epi、Svn,epi、Rsvn、λejpi、Vn,epi、Sn,epi、Rnp及NLS在胃腺癌、胃腺瘤及正常胃粘膜上皮3个组别的方差分析中差异均有统计学意义,F值分别为26.664,8.406,12.247,15.764,14.49,19.707,21.597,73.64;P值分别为0.000,0.001,0.001,0.000,0.000,0.000,0.000,0.000)。组间多重比较显示:胃腺癌的Vvn,epi、Svn,epi、Vn.epi、Sn.epi及Rnp均分别大于胃腺瘤及正常胃粘膜上皮,且依次递减;胃腺癌的Rsvn、λepi及Nvn.epi均分别小于胃腺瘤及正常胃粘膜组织,且依次递增;胃腺瘤的NLS大于胃腺癌及正常胃粘膜上皮。胃腺瘤的Vvn,epi、Rnp和NLS均大于正常胃粘膜上皮(P=0.005,P=0.020,P=0.000);胃腺瘤的Rsvn和λepi均小于正常胃粘膜上皮(P=0.003,P=0.028);胃腺瘤的Svn,epi、Vn,epi、Sn,epi、Nvn,epi与正常胃粘膜上皮相比差异无统计学意义(P=0.27,P=0.205,P=0.274,P=0.741);胃腺癌的Svn,epiRsvn、Nvn,epi和λepi与胃腺瘤相比差异无统计学意义(P=0.088,P=0.87,P=0.709,P=0.103)。在不同分化程度的胃腺癌中,Vvn,epi、Svn,epi及Rnp值最大的为低分化胃腺癌,其余依次为中分化胃腺癌和低分化胃腺癌;λepi值最大为高分化胃腺癌,其余依次为中分化胃腺癌和低分化胃腺癌。Nvn,epi、Rsvn、Vn,epi及Sn,epi并不按高、中、低分化胃腺癌顺序递增或递减,低分化胃腺癌的Nvn,epi和Rsvn最大,其次为高分化胃腺癌,中分化胃腺癌最小;中分化胃腺癌的Vn,ep最大,其次为高分化胃腺癌,低分化腺癌胃最小;中分化胃腺癌的Sn,epi最大,其次为低分化胃腺癌,高分化胃腺癌最小此外高分化胃腺癌的Vvn,epi、Svn,epi、Nvn,epi、Rsvn、λepi、Vn,epi、Sn,epi、Rnp及NLS9项参数的变异系数分别为0.1293、0.2278、0.5824、0.1367、0.2004、0.3366、0.2379、0.1876和0.1322;中分化胃腺癌上述参数的变异系数分别为:0.1641、0.1794、0.4177、0.1396、0.2558、0.3596、0.2379、0.2535和0.2086;低分化胃腺癌上述参数的变异系数分别为:0.1434、0.2098、0.2582、0.2835、0.2780、0.3075、0.3370和0.3116;胃腺瘤上述参数的变异系数分别为0.1221、0.1340、0.1460、0.0753、0.1686、0.0652、0.0613、0.1668和0.1604。二、胃上皮性肿瘤的判别分析及逐步判别分析结果1.判别分析结果:由参数Vvn,epi、Svn.epi、Nvn,epi、Rsvn、λepi、Vn,epi、Sn,epi、Rnp及NLS建立的判别函数(1)判别胃腺癌,胃腺瘤及正常胃粘膜上皮的准确度分别为97.1%、87.5%和100%,平均准确度为96.8%;建立的判别函数(2)判别胃腺癌与正常胃粘膜上皮的准确度为97.1%和100%,平均准确度为98.1%;建立的判别函数(3)判别胃腺瘤与正常胃粘膜上皮的准确度均为100%,平均准确度为100%;建立的判别函数(4)判别胃腺癌和胃腺瘤的准确度分别为100%和87.5%,平均准确度为97.7%;建立的判别函数(5)判别高分化胃腺癌、中分化胃腺癌、低分化胃腺癌及正常胃粘膜上皮的准确度分别为46.7%、75%、95%和84.2%,平均准确度为74.5%;建立的判别函数(6)判别高分化、中分化和低分化胃腺癌的准确度分别为60%、65%、95%,平均准确度为74.5%。函数(1)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)如下:函数(1)式中Ya、Yb、Yc分别表示胃腺癌、胃腺瘤和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(2)式中Ya、Yc分别表示胃腺癌和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(3)式中Yb、Yc分别表示胃腺瘤和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(4)式中Ya、Yb分别表示胃腺癌和胃腺瘤的判别函数函数(5)式中Ya1、Ya2、Ya3、Yc分别表示胃高分化、中分化、低分化腺癌和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(6)式中Ya1、Ya2、Ya3分别表示胃高分化、中分化和低分化腺癌的判别函数2、逐步判别分析结果由逐步判别分析筛选出的参数Svn,epi、Vvn,epi、Sn,epi及NLS所建立的判别函数(7)判别胃腺癌和胃腺瘤及正常胃粘膜上皮的准确度分别为97.1%、87.5%和100%,平均准确度为96.8%。由逐步判别分析筛选出的参数Sn,epi、Nvn,epi和NLS所建立的判别函数(8)判别胃腺癌和正常胃粘膜上皮的准确度分别为97.1%和100%,平均准确度为98.1%。由逐步判别分析筛选出的参数Rsvn和NLS所建立的判别函数(9)判别胃腺瘤和正常胃粘膜上皮的准确的均为100%,平均准确度为100%。由逐步判别分析筛选出的参数λeji、Vn,epi、Sn,epi和NLS所建立的判别函数(10)判别胃腺癌和胃腺瘤的准确度为100%和87.5%,平均准确度为97.7%。由逐步判别分析筛选出的参数Vvn,epi、Svn,pi、Vn,epiv、λep和Rnp所建立的判别函数(11)判别胃高分化腺癌、中分化腺癌、低分化胃腺癌及正常胃粘膜上皮的准确度分别为53.3%、70%、95%和88.2%,平均准确度为77%。由逐步判别分析筛选出的参数Vvn,epi和Svn,epi所建立的判别函数(12)判别胃高分化腺癌、中分化腺癌、低分化胃腺癌的准确度分别46.7%、75%和95%,平均准确度为74.5%。函数(7)式中Ya、Yb、Yc分别表示胃腺癌、胃腺瘤和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(8)式中Ya、Yc分别表示胃腺癌和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(9)式中Yb、Yc分别表示胃腺瘤和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(10)式中Ya、Yb分别表示胃腺癌和胃腺瘤的判别函数函数(11)式中Ya1、Ya2、Ya3、Yc分别表示胃高分化、中分化、低分化腺癌和正常胃粘膜上皮的判别函数函数(12)式中Ya1、Ya2、Ya3分别表示胃高分化、中分化和低分化腺癌的判别函数结论1、Vvn, epi、Svn,epi、Rsvn、λepi、Vn, epi、Sn, epi、Rnp及NLS的变化在胃良、恶性上皮性肿瘤及正常胃粘膜上皮之间具有显著的差异性及规律性,其定量分析有助于胃良、恶性上皮性肿瘤的辅助诊断及分级分析。2、用参数Vvn,epi、Svn,epi、Rsvn、λepi、Vn., epi、Sn,epi、Rnp及Nls建立判别函数对胃腺癌、胃腺瘤及正常胃粘膜上皮进行判别,准确度分别为97.1%、87.5%和100%;用参数Bvn,epi、Svn,epi、Vn,epiv、λepi和Rnp建立判别函数对胃高分化、中分化、低分化腺癌及正常胃粘膜上皮进行判别,准确度分别为53.3%、70%、95%和84.2%;用参数Vvn, epi和Svn,epi建立判别函数对胃高分化、中分化和低分化腺癌进行判别,准确度分别为46.7%、75%和95%。3、在实际诊断判别中,我们认为对胃上皮性肿瘤的判别可以采取以下步骤:对送检的胃组织,制作成HE切片后,测试Vvn.epi、Svn.epi、Rsvn、λepi、Vn,epi、Sn,epi、Nvn,epi、Rnp及NLS参数值,可先用判别函数(7)判别是胃腺癌、胃腺瘤还是正常胃粘膜上皮;或用判别函数(8)区分胃腺癌和正常胃粘膜上皮,用判别函数(9)区分胃腺瘤和正常胃粘膜上皮,判别函数(10)区分胃腺癌和胃腺瘤;最后用判别函数(12)对胃腺癌进行高、中、低分化进行分级。