【摘 要】
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目的：在结肠癌中，钙周期素结合蛋白（CacyBP/SIP）的入核可以促进结肠癌的发生发展，在人结肠癌SW480细胞中，筛选出CacyBP/SIP核转位后与其相互作用的蛋白质。方法：构建pGC-FU-CBP-SBP-
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目的：在结肠癌中，钙周期素结合蛋白（CacyBP/SIP）的入核可以促进结肠癌的发生发展，在人结肠癌SW480细胞中，筛选出CacyBP/SIP核转位后与其相互作用的蛋白质。方法：构建pGC-FU-CBP-SBP-cacyBP-3X Nuclear targeting sequences慢病毒载体并且包装慢病毒上清，之后用病毒上清感染人SW480细胞，Westernblotting方法用来检测感染病毒后SW480细胞中融合蛋白CBP-SBP-cacyBP-3XNuclear targeting sequences和内源性CacyBP/SIP的蛋白表达情况。串联亲和层析法和免疫沉淀法被用来纯化与靶蛋白CacyBP/SIP相互作用的下游蛋白复合物，之后行质谱分析蛋白复合物的具体组成成分并分析数据结果。结果：CBP-SBP-cacyBP-3X Nuclear targeting sequences慢病毒包装成功，病毒滴度为2×108TU/mL。 Western blotting方法从蛋白水平上证实了融合蛋白CBP-SBP-cacyBP-3X Nuclear targeting sequences在人SW480细胞的细胞核中的正确表达。串联亲和层析方法并未筛选与CacyBP/SIP相互作用的下游信号分子，但是从免疫沉淀法筛选的蛋白复合物质谱数据分析：肌动蛋白可能是与CacyBP/SIP相互作用的一个有意义蛋白分子。结论：1.成功包装CBP-SBP-cacyBP-3X-Nuclear targeting sequences慢病毒；2.慢病毒CBP-SBP-cacyBP-3X-Nuclear targeting sequences成功感染SW480细胞，融合蛋白在细胞核内成功表达；3肌动蛋白可能与CacyBP/SIP发生相互作用，促进结肠癌的发生发展。
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