Genistein（5，7，4’——三羟基异黄酮）是一种植物雌激素，是大豆黄酮类的主要成分之一。九十年代初的流行病学调查资料显示，摄用高豆类饮食与乳腺癌、大肠癌、前列腺癌等的低发病率有关。近年来，大量研究证实了Genistein具有广泛的抗肿瘤、抗增殖作用，其作用机制为多重抑瘤效应，包括抗氧化作用，特异性抑制酪氨酸磷酸化，抑制肿瘤浸润、转移，抑制新生血管形成，促进肿瘤细胞分化，减低肿瘤恶性程度，引起肿瘤细胞周期阻滞、诱导肿瘤细胞凋亡等等。最近研究还表明，Genistein可减轻紫外辐射损伤与辐射致癌作用；对骨代谢表现有一种类似雌激素的保护作用；并可影响细胞辐射损伤与修复信号的转导，抑制DNA损伤修复，可能兼具抗放作用和辐射协同抑瘤效应。本课题通过体外细胞培养和建立裸鼠荷瘤模型，在体和离体实验相结合，研究Genistein结合放疗对人乳腺癌细胞抑瘤效应及造血辐射防护作用的特点和可能的机理，为过渡到可能的临床试用提供实验依据。 本研究内容主要包括三个部分：①分别通过MTT法与细胞集落形成法测定Genistein对5种不同细胞（肿瘤细胞MCF—7、MDA—MB—231及正常组织细胞IEC—6、CFU—F、CFU—GM）的IC₅₀值，评价其对不同细胞增殖抑制作用的选择性。运用流式仪技术、活细胞计数、³H—TdR掺入法观察Genistein与γ射线照射两者联用对MCF—7离体培养细胞的抑瘤作用有无协同效应，并对其可能的机制进行探讨；②观察不同照射剂量、不同给药剂量下Genistein对小鼠的整体和造血辐射防护效果，研究在体情况下Genistein是否具有造血辐射防护作用；③建立裸鼠荷瘤模型，通过细胞有丝分裂计数、细胞集落计数、兔疫组化、图像分析等多种技术方法研究在体情况下Genistein与Y射线照射联用在同一个体上能否同时具有抑瘤效应和造血辐射防护效果，并对几个主要疗效影响因素进行正交分析，为设计优化组合治疗方案打基础。 获得以下主要结果： 1．Genistein对5种不同细胞具有抗增殖作用的选择性，作用大小依次为：MDA—MB—231＞MCF—7＞IEC—6＞CFU—GM＞CFU—F，提示Genistein对造血组织毒性较低，而对肿瘤细胞选择性较高，可能为一种低毒有效的抗肿瘤药物。 2．不同浓度＊0—100卜M)Genistein及 18GyY射线照射均出现抑制癌细胞增殖的作用，细胞计数和勺一TdR掺入法显示癌细胞生长减慢，DNA合成受抑，其中照后给药方式抑瘤作用显著高于其它方式，照前给药则与单纯给药、单纯照射组无显著差异。提示利用Genistein照后给药可能与放射有协同效果。流式仪分析结果表明：照后给药引起的GZ／M周期阻滞和细胞凋亡作用更强，而o期比例较低，与照前给药及二单因素组存在显著差异。推测这可能是照后给药抑瘤作用增强的机制之一。 3．Genistein＊．0—16．omg瓜g)照前给药对 2刀Gy一次性全身照射损伤裸鼠具有一定造血辐射防护作用，并在2刀一8刀mg从g范围内呈明显量效关系。但8刀mg从g以上再进一步加大给药剂量，防护效果不再明显提高。整体防护实验结果表明，Genisteinp刀mg儿g)对 7—SGy照射损伤昆明小鼠整体活存率及平均生存时间未显示明显防护作用，而造血防护实验结果显示其对6Gy以下照射损伤小鼠的造血功能有不同程度防护效果，其中对CFU—S的效果最为明显。提示Genistein照前给药对小鼠造血系统有一定辐射防护作用。 4．荷瘤裸鼠整体动物实验结果显示：Genisteinp．omg瓜g)结合放射对肿瘤生长的抑制效果显著大于两单一措施效果之和，说明该药对肿瘤放疗有协同作用。并使造血高于等剂量单纯照射组，达到了正常水平。 VI 5．进选出一种优化组合治疗方案，即对ER(一浮腺癌，采用直线加速器局部分次照射，照后Genistein（Zm从g）皮下注射，在本实验设计的几种方案中取得了最佳效果。