柑橘黄龙病防控药剂筛选及防控技术研究

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柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)是世界范围内流行的毁灭性柑橘病害,各大柑橘主产国都将其列入重大植物检疫性对象。近年来,柑橘黄龙病的传播范围越来越广,危害程度也随之加剧,难以根除。柑橘黄龙病菌亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus, Las)是危害程度最广的黄龙病病原菌,是一种限于筛管组织内寄生,通过柑橘木虱(Diaphorina citr)传播的革兰氏阴性细菌。目前,黄龙病菌尚不能进行成功的离体培养,因此筛选防治药剂的工作进行迟缓。在尚无理想的特效药剂和抗病品种的情况下,防控木虱、挖除病树和种植无病苗木是目前柑橘黄龙病防控的三大核心措施。柑橘黄龙病病树的药剂筛选和防控工作国内外一直在进行,以期获得黄龙病的有效防控药剂和方法。本文以田间柑橘黄龙病罹病植株为防治对象,采用植株韧皮部输液、叶面喷药、树干枝条局部敷药和热力治疗等技术,通过实时定量PCR(real-time quantitativePCR)对病株体内黄龙病病原菌进行长期的动态监测跟踪,从而进行药剂筛选和防控技术评价。主要结果和结论如下:建立了柑橘黄龙病防效评价体系:通过实时定量PCR对候选药剂及防控技术处理前后植株体内带菌量的变化进行8个月的跟踪监测,并与对照组进行相对防效分析,从而筛选出有效防控药剂与防控技术。相对防效只能初步评价黄龙病的防控效果;而对于寄主植株黄龙病的综合防治效果,还需要进行施药后的病害症状观察和植株长势情况评估。通过病树树干基部韧皮部药液吊瓶输液技术,2,2-二溴-3-次氮基丙酰胺(DBNPA)、异噻唑啉酮和氨苄青霉素3种候选防治药剂,采集叶片样品提取DNA,用定量PCR连续检测8个月,1g/L的DBNPA、氨苄青霉素和异噻唑啉酮的相对防效分别达到89.75%,87.27%和83.72%,初步表明对黄龙病有一定防控作用。以1g/L ZnSO4、CuSO4病树树干韧皮部基部输液试验,处理后8个月,连续定点采样检测ZnSO4处理组带菌量下降了70%,而CuSO4带菌量低于30%,相对防效分析表明ZnSO4相对防效达到56.62%,而CuSO4没有明显的防控效果,结果表明对黄龙病引起的缺素症采取ZnSO4韧皮部输液疗法,可以在一定程度上起到增强树势、缓解黄龙病发病率的效果。经叶面喷施0.6g/L噻唑锌和0.5g/L王铜后,前者带菌量几乎没有变化,后者带菌量下降了15%。黄龙病病树相对防效达到51.60%和49.53%,与对照对比,黄龙病病症没有加剧,对黄龙病有一定的防控效果。采用树干/枝条药膏敷贴试验结果表明,连续施用7个月后,春雷霉素、锌菌胺及中生菌素带菌量较施药初始增加,相对防效几乎没有变化。黄龙膏药贴药处理60天带菌量下降56%,相对防效达到69.41%,试验表明贴药治疗对阻止黄龙病向下扩展具有一定作用;但长期施用后整体防控效果不如韧皮部输液及叶面喷施,药剂扩展较缓,速效性差。农膜热罩短时热力处理试验,维持罩内上部温度44~50°C,每次处理6小时,有效热疗积温达到367.5°C时,黄龙病病树体内带菌量下降率为99%,同未处理的病株相比相对防效可以达到99%,同时树势恢复快,黄龙病症状减轻。罩内温度不能超过50°C,否则容易灼伤植株。对于成年果树是比较有效的防控措施。柑橘黄龙病的田间防控,需要依据树龄、因地制宜采取不同的防控方法。对3年生以下的幼树和嫁接苗可以考虑笼罩短时热力杀菌;而黄龙病成年结果大树,可以采取较长时间的热处理,或树干滴注的韧皮部施药方式控制病害;田间新发病树可以在下部枝干贴药的阻断病害向下扩展的施药技术;而对于失去经济价值的老病树则应直接挖除焚烧。无论是药剂防控还是热力防控,都不适合在发病株率30%以上的柑橘园使用。本研究筛选出对黄龙病有效的化学药剂以及配套的施药方法,为目前国内外柑橘黄龙病的综合防控提供了参考依据和适合的防控技术,对减少病害重大损失和控制病情扩展,提高我国柑橘黄龙病的防控技术水平具有重要的意义。
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