本研究参照GenBank上所公布的狂犬病病毒CVS-24株糖蛋白、核蛋白基因序列，运用DNAstar软件对其进行抗原表位分析，于糖蛋白基因上选取2段、核蛋白基因上选取3段表位富集区，依照引物设计原则，利用计算机软件设计5对特异性引物。通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)，获得5段目的基因，经测序正确后，将其插入表达载体pET-28a(+)构建成重组质粒。然后，将所构建的5个重组质粒分别导入表达宿主菌E.coil Rosetta，IPTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE和Western-blotting检测，结果表明，5段目的基因在大肠杆菌E.coil Rosetta中均获得高效表达，且所表达的目的蛋白中有4个具有良好反应原性。在此基础上，进行间接ELISA检测，筛选出反应原性最好的目的蛋白作为包被抗原。进一步进行ELISA条件优化，确定检测狂犬病病毒血清抗体间接ELISA检测方法的条件。经交叉反应试验和阻断试验证实，本研究所建立的间接ELISA方法特异性良好。以上研究为建立一种敏感特异的狂犬病病毒血清抗体检测试剂盒奠定了基础。