益气涤痰逐瘀方“涤痰”和“逐瘀”药对调节COPD气道重塑TGF-β1/Smad通路的实验研究

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目的:基于TGF-β1/Smad通路,选取云南省名中医临床治疗慢性阻塞性肺疾病的经验方“益气涤痰逐瘀方”中的“涤痰”和“逐瘀”两个药对,探讨其改善局部炎症微环境,清除炎症介质和病理产物,调节细胞因子平衡,减缓或阻止气道重塑发展的作用机理,为从中医药中寻求多靶点防治COPD,干预气道重塑的发生发展提供理论依据。方法:复制COPD气道重塑大鼠模型,观察致纤维化的关键因子——TGF-β1的变化情况,分别给予涤痰药对和逐瘀药对低、中、高剂量进行干预,通过ELISA法和Western blot法检测肺组织中SIgA、plgR/SC、MMP-9、TIMP-1、VEGF和TGF-β1/Smad通路中TGF-β1、Smad2/3、Smad7表达水平,探讨该方“活血、散结”改善气道炎症,减缓气道重塑发展的机理。结果:1.肺组织病理切片HE染色结果模型组大鼠肺内细支气管周围有大量炎性细胞浸润,气道壁可见大量纤维组织增生,管腔狭窄,肺泡腔明显扩张,部分肺泡腔融合成肺大泡,可见明显的肺气肿表现,表明COPD模型复制成功。“涤痰”和“逐瘀”药对低剂量组对肺组织病理表现均有所改善。2.各组大鼠肺组织中SIgA、plgR/SC、MMP-9、TIMP-1、VEGF、TGF-β1、Smad2/3、Smad7表达的变化模型组大鼠SIgA、plgR/SC、TIMP-1、VEGF、TGF-β1、Smad2/3表达水平明显升高,MMP-9、Smad7表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,“涤痰”和“逐瘀”药对低剂量组SIgA、plgR/SC、TIMP-1、VEGF、TGF-β1的表达水平下调作用明显,对MMP-9的上调作用明显,差异有统计学意义(P<0.05)。涤痰药对低剂量组大鼠肺组织中Smad2/3表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。涤痰药对高剂量组和逐瘀药对低、中、高剂量组Smad7表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.益肺散结法方药中“涤痰”药对通过抑制TGF-β1表达阻止Smad2/3磷酸化,是该药对通过“散结”作用干预COPD气道重塑的可能靶点之一。2.“涤痰”药对对TGF-β1/Smad通路的调节作用呈现一定的量效关系,以临床等效剂量的调节作用最明显。3.“涤痰”和“逐瘀”药对通过对COPD气道重塑发病相关炎症因子SIgA、plgR/SC、MMP-9、TIMP-1、VEGF表达的调节,减缓气道炎症反应,是干预COPD气道重塑发生发展的机理之一,以临床等效剂量效果较好。
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