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目的：制备转染率高、安全无毒的新型壳聚糖-聚乙二醇纳米基因载体,研究其介导的靶向人survivin的RNAi基因纳米复合物对结肠癌细胞HT-29中survivin mRNA的表达,及其对HT-29细胞凋亡和增殖的影响和意义。方法：通过两步接枝共聚法,优化制备工艺,制备粒径较小、粒度分布均匀的壳聚糖-聚乙二醇纳米颗粒。使用Malvem Zetasizer3000E对纳米粒的粒径及zeta电位进行检测；利用原子力显微镜对纳米颗粒的形态进行观察。选取人survivin基因（NM001168）序列中的相关位点序列构建靶向survivin的shRNA重组质粒,通过序列测定检测重组子的正确性,再从中筛选出最佳的survivin shRNA重组质粒载体。合成壳聚糖-聚乙二醇纳米粒介导的survivin RNAi基因纳米复合物,将其导入结肠癌细胞HT-29中（以携带相同shRNA的脂质体载体,survivin shRNA以及阴性对照shRNA为对照）。用RT-PCR和Western-blot分别检测转染后的HT-29细胞中Survivin mRNA和蛋白表达量的变化；通过MTT法检测细胞凋亡情况；结果：Malvem Zetasizer 3000E激光粒度分析仪进行粒径及分布的检测结果显示,制备出的壳聚糖-聚乙二醇纳米颗粒的平均粒径值为61nm。粒径大小分布呈正态分布,分布均匀。原子力显微镜进行观测。纳米颗粒呈圆球形,表面平滑完整,分散良好,较少粘附团聚现象；且细胞毒性低、转染率高。序列测定重组质粒载体survivin-shRNA构建正确。转染壳聚糖-聚乙二醇介导的survivin shRNA基因纳米复合物后发现,该基因纳米复合物对结肠癌细胞HT-29的转染效率显著高于survivin shRNA和脂质体载体（P<0.01）；HT-29细胞中Survivin mRNA拷贝数及蛋白表达显著降低（P<0.01）,且结肠癌细胞HT-29的细胞死亡率和凋亡率明显提高（P<0.01）。结论：本研究成功制备出平均粒径为61nm,分布均匀的壳聚糖-聚乙二醇纳米颗粒；其细胞毒性低、转染率高。合成的壳聚糖-聚乙二醇介导survivin shRNA基因纳米复合物能够高效转染结肠癌细胞株HT-29并有效干扰Survivin,且较之携带相同shRNA的脂质体载体,survivin shRNA和阴性对照shRNA具有更高的干扰效率,能高效地诱导结肠癌细胞凋亡并抑制其增殖。其介导RNA干扰能长时间高效率地沉默结肠癌细胞HT-29中的Survivin基因表达。